[发明专利]一种硅基化合物固定化酶生物催化剂及其制备方法

权利要求书

1.一种硅基化合物固定化酶生物催化剂的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括如下步骤：

（1）硅基载体的改性处理：

S1：将硅基化合物加入到NaOH溶液中反应，NaOH浓度为1-3M，加热回流搅拌反应2-3h，之后将反应物用水清洗至中性并烘干过筛，筛网大小为200目；

S2：将上述得到的硅基化合物加入到乙醇中，再加入正硅酸四乙酯，混合均匀后加入H₂SO₄，H₂SO₄浓度为0.01-0.5moL/L，使得溶液pH值为3-5，之后恒温水解6h，反应结束后将所得预处理硅基化合物恒温烘干；硅基化合物、乙醇、正硅酸四乙酯、硫酸的质量用量比为5：300-360：20-40：1；混合反应水解温度为30℃-70℃；

S3：取上述预处理硅基化合物加入甲苯和乙烯基三乙氧基硅烷，加热搅拌回流，反应结束后用甲苯和二氯甲烷交替清洗至少3次，最后干燥得到改性后的硅基化合物载体；所述硅基化合物与乙烯基三乙氧基硅烷质量配比为0.3-0.5：3；

（2）在改性的硅基化合物载体上固定化酶：

S1：将脂肪酶粉溶解于醋酸缓冲液中并室温搅拌反应，之后离心取上清液，过滤得到预处理脂肪酶液；

S2：将步骤（1）中制备得到改性后的硅基化合物载体加入到上述预处理脂肪酶液中，室温水浴反应，随后固液分离取固相，并用磷酸氢二钠-磷酸二氢钾缓冲液清洗至少三次，最终得到固定化酶生物催化剂；

改性后的硅基化合物载体与预处理脂肪酶液的质量比为1：5-20。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤（1）S1中所述硅基化合物为空心玻璃珠N20、N30、N40或N100中的至少一种。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤（1）S2中恒温烘干条件为：先在30-70℃烘16h，之后80℃烘干8h；水解温度为30℃-70℃。

4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤（2）S1中除脂肪酶还可以为漆酶或辣根过氧化物酶。

5.一种如权利要求1-4中任一项所述的制备方法所得的硅基化合物固定化酶生物催化剂。