[发明专利]一种色谱分析柱多层组装制备方法

说明书

一种色谱分析柱多层组装制备方法，涉及色谱柱制备。将出口端带有筛板和固定螺帽的空柱管与匀浆液罐连接，并将所需的填料匀浆液分成几等份，依次倒入匀浆液罐内，通过高压泵将顶替液压入匀浆液罐，进而依次将色谱填料压入空柱管内，将所有等份的匀浆液都压入色谱柱管内后，取下色谱柱，并添加筛板和固定螺帽，即得到多层组装制备的色谱分析柱。此技术可以装填具有更加紧实柱床的色谱柱，所得色谱柱具有柱效高等优点。由于采用了多层组装方法，每层柱床填充时，匀浆液中填料颗粒均呈现高度分散状态，杜绝了常规单次填充过程中填料聚集和沉降，减少柱床不均匀和空隙的存在。此方法操作简单，可显著提高色谱柱的分离性能。

技术领域

本发明涉及色谱柱制备，尤其是涉及一种色谱分析柱多层组装制备方法。

背景技术

色谱柱柱床的均一性是影响柱效的决定性因素，为了提高柱效，对色谱填料的匀浆液种类、顶替液种类、装柱压力等因素进行考察和优化，其最终目的是为了获得具有紧实且均一的柱床。而在传统的填充过程中，填料匀浆液被一次性倒入较大体积的匀浆罐，而大体积匀浆液被顶替液压入色谱柱管的过程是一个较长的过程，一般有10～20min，在此过程中，填料会逐渐出现聚集、沉降等不利现象，进而造成色谱柱管中的柱床出现不同程度的空隙，并出现色谱柱前端和后端柱床不均一，这些均会造成柱效下降。

发明内容

本发明的目的是为了克服常规色谱柱填充方法的缺点，提供可以实现色谱柱柱床的高度均一填充制备，显著提升色谱柱柱效，所得色谱柱具有高度均一的柱床，可获得高柱效色谱分析柱的一种色谱分析柱多层组装制备方法。

本发明的具体步骤为：将出口端带有筛板和固定螺帽的空柱管与匀浆液罐连接，并将所需的填料匀浆液分成若干等份，依次倒入匀浆液罐内，通过高压泵将顶替液压入匀浆液罐，进而将色谱填料压入空柱管内，将所有等份的匀浆液都压入色谱柱管内后，取下色谱柱，并添加筛板和固定螺帽，即得到多层组装制备的色谱分析柱。

所述将所需的填料匀浆液分成几等份，即将填装一根色谱柱所需的填料与对应的分散液混合后，形成填料悬浮液后分成若干等份，优选五等份；在倒入匀浆罐之前通过搅拌、超声等方法保持填料的分散与悬浮。

所述将色谱填料压入空柱管内的具体方法可为：每次匀浆液罐中的悬浮液被完全压入色谱柱管内后，打开匀浆液罐，取出其中的顶替液，然后倒入下一份匀浆液，密封后继续将填料压入色谱柱管，重复上述操作直到所有填料匀浆液都压入色谱柱管中。

所述压入色谱柱管的压力可为2000～15000psi。

所述将所有等份的匀浆液都压入色谱柱管内后，可采用更高压力进一步持续压实色谱柱管内填料，维持10～60min，然后逐步降压，并在最低压力维持30～60min，以使柱床内压力充分平衡。

所述高压力高于压入匀浆液的压力，低压力为装柱系统最低压力。

所述取下色谱柱，并添加筛板和固定螺帽是将色谱柱从匀浆液罐下端分离，在柱管的前端添加筛板和固定螺帽。

所述色谱柱管的内径可为2～1000mm，长度可为10～5000mm。

本发明可以装填具有更加紧实柱床的色谱柱，所得色谱柱具有柱效高等优点。由于采用了多层组装方法，每层柱床填充时，所用匀浆液均为高度分散的色谱填料，杜绝常规单次填充过程中填料聚集和沉降，减少柱床不均匀和空隙的存在。此方法操作简单，可显著提高色谱柱的分离性能。

附图说明

图1为本发明五层组装制备多孔聚苯乙烯色谱柱的装置。

图2为传统单次匀浆填充法制备多孔聚苯乙烯色谱柱的装置。

图3为本发明实施例制备色谱柱的分离效果图。

图4为对比例制备色谱柱的分离效果图。

具体实施方式