[发明专利]重组腺相关病毒、其突变体及其构建方法和应用有效
| 申请号： | 202110205713.1 | 申请日： | 2021-02-24 |
| 公开（公告）号： | CN112961219B | 公开（公告）日： | 2022-08-12 |
| 发明（设计）人： | 李轶女;张志芳;刘兴健;杜梦潭;尚玉婷;易咏竹;鲁念;高维崧 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院生物技术研究所 |
| 主分类号： | C07K14/015 | 分类号： | C07K14/015;C12N15/864;C12N15/866;C12N5/10;C12N7/01;A61K48/00 |
| 代理公司： | 北京思元知识产权代理事务所(普通合伙) 11598 | 代理人： | 余光军;霍雪梅 |
| 地址： | 100081 北*** | 国省代码： | 北京;11 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 重组 相关 病毒 突变体 及其 构建 方法 应用 | ||
1.腺相关病毒rep cassette的突变体，其特征在于，将SEQ ID NO.1所示的氨基酸按照V486G所示的氨基酸单位点突变获得的突变体。
2.腺相关病毒rep cassette的突变体，其特征在于，将SEQ ID NO.1所示的氨基酸按照F63S-V486G、P281C-V486G或F458C-V486G所示的任何一种氨基酸双位点突变获得的突变体。
3.腺相关病毒rep cassette的突变体，其特征在于，将SEQ ID NO.1所示的氨基酸按照F63S-P281C-V486G所示的氨基酸多位点突变获得的突变体。
4.权利要求1-3任何一项所述的突变体在构建重组腺相关病毒载体中的用途。
5.一种重组腺相关病毒载体，包括rep cassette、cap cassette和ITRs cassette，其特征在于，所述的rep cassette的氨基酸序列是将SEQ ID NO.1所示的氨基酸按照V486G所示的氨基酸单位点突变获得的突变体；或者是将SEQ ID NO.1所示的氨基酸按照F63S-V486G、P281C-V486G或F458C-V486G所示的任何一种氨基酸双位点突变获得的突变体；或者是将SEQ ID NO.1所示的氨基酸按照F63S-P281C-V486G所示的氨基酸多位点突变获得的突变体。
6.一种构建权利要求5所述重组腺相关病毒载体的方法，其特征在于，包括：将所述的rep cassette、cap cassette以及ITRs cassette的编码基因分别克隆到杆状病毒转移载体中获得重组转移载体；将重组转移载体与杆状病毒DNA共转染昆虫细胞，分别获得三种重组杆状病毒；将三种重组杆状病毒混合感染昆虫宿主或者细胞，培养被感染的昆虫细胞或宿主获得重组腺相关病毒载体；
或者将所述的rep cassette的编码基因以及cap cassette的编码基因分别连接到转移载体pP10和pEGT载体中，获得重组转移载体pP10-rep和pEGT-cap；通过red重组酶系统和FLP-FRT系统获得rBmBac-rep-cap；将所述的ITRs cassette的编码基因与pVL1393连接构建得到重组转移载体pVL1393-ITRs；将所得的rBmBac-rep-cap与重组转移载体pVL1393-ITRs共转染获得重组杆状病毒；将重组杆状病毒感染昆虫细胞，培养被感染的昆虫细胞获得重组杆状病毒；将重组杆状病毒感染昆虫细胞或宿主，培养被感染的昆虫细胞或宿主获得重组腺相关病毒载体。
7.权利要求5所述重组腺相关病毒载体作为基因呈递载体或者作为制备基因治疗药物中的用途。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于中国农业科学院生物技术研究所，未经中国农业科学院生物技术研究所许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/202110205713.1/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
