[发明专利]肌酸激酶同工酶测定试剂盒

说明书

本发明公开了肌酸激酶同工酶(CKMB)测定试剂盒，包括第一试剂和第二试剂，其中第一试剂为含有聚乙二醇和肝素的磷酸盐缓冲液；所述第二试剂为含有肌酸激酶同工酶胶乳抗体和透明质酸的甘氨酸缓冲溶液。本发明肌酸激酶同工酶测定试剂盒可通过定量客观反映CKMB的存在，为临床诊断及疗效观察和预后判断提供了更有力的实验诊断依据。本发明所提供的肌酸激酶同工酶测定试剂盒特异性高，重复性好，检测灵敏度高，线性范围宽，稳定性高。

技术领域

本发明属于生物检测技术领域，具体涉及肌酸激酶同工酶测定试剂盒，特别是涉及一种胶乳免疫比浊法肌酸激酶同工酶测定试剂盒及其应用。

背景技术

肌酸激酶(CreatineKinase,CK)广泛存在于各种组织中，与三磷酸腺苷(ATP)的再生有关。肌酸激酶是由M和B两种亚单位组成的二聚体，在细胞质内共有三种同工酶：即CK-MM、CK-MB和CK-BB。在细胞线粒体内还有另一种同工酶，称为CK-Mt。这几种同工酶虽然相对分子质量相同，但是免疫特性不同。肌酸激酶的同工酶在临床诊断中有十分重要的意义，在各种病变包括肌肉萎缩和心肌梗塞发生时，人的血清中肌酸激酶水平迅速提高，目前认为在心肌梗塞的诊断中测定肌酸激酶的活性比做心电图更为可靠。心肌梗死时，肌酸激酶在起病6小时内升高，24小时达高峰，3-4日内恢复正常。其中肌酸激酶的同工酶CK-MB诊断的特异性最高，临床上主要用于心肌梗死、病毒性心肌炎的辅助诊断。

肌酸激酶同工酶测定的方法有电泳法、离子交换柱层析法、免疫抑制法、金标记法、免疫酶标法和放射免疫法等。常规应用电泳法和免疫抑制法较多，但电泳法无法应用于全自动生化分析仪，所用仪器价格昂贵，所以无法普及。其他常用检测还有免疫比浊法和酶联免疫吸附法等。由于酶联免疫吸附法检测耗时且操作复杂，已经不能满足大型医院快速定量检测的要求，而免疫比浊法随着全自动生化仪的普及，已经发展出来多种快速免疫比浊检测技术。

乳胶增强免疫透射比浊法的基本原理是，首先将抗体吸附在一种胶乳颗粒上，当遇到相应的抗原时，抗原抗体结合而出现乳胶凝集。单个乳胶颗粒的大小在入射波长之内，光线可透过，当两个以上的乳胶颗粒凝集时，可阻碍光线透过，使得透射光减少，其减少程度与抗原的量成正比。此法提高了检测的灵敏度和准确度，得到了广泛的应用。然而，乳胶增强免疫比浊法反应后会产生沉淀，不利于生化仪的清洗，干扰试验结果，且乳胶制造成本较高，导致免疫比浊试剂盒价格和检测成本偏高。因此又出现了纳米颗粒增强的免疫比浊法，如专利CN101680890便公开了一种通过比浊法测量人抑半肮氨酸蛋白酶蛋白C的比浊免疫测定方法和试剂组合，以及中国专利CN101819208中公开了一种利用微球免疫比浊法检测脑钠肽试剂盒。专利CN101680890中具体公开了，表面修饰了抗体的由聚苯乙烯、聚氯乙烯、环氧树脂、聚偏1,1-二氯乙烯、聚-α-萘基甲基丙稀酸酯、聚乙烯萘以及它们相应的共聚物制成的粒径在80-105nm的有机高分子胶体纳米颗粒。

中国专利申请CN 109613242 A公开了一种肌酸激酶同工酶检测试剂盒及其制备方法，包括：磁分离试剂和酶标记抗体；磁分离试剂包括：表面上结合有第一抗CK-MB单克隆抗体和第二抗CK-MB单克隆抗体的磁微粒；酶标记抗体包括：酶标记的第三抗CK-MB单克隆抗体；和/或，酶标记的第四抗CK-MB单克隆抗体；其中，第一、第二、第三和第四抗CK-MB单克隆抗体分别特异于肌酸激酶同工酶的不同表位。

中国专利申请CN 108548926 A公开了一种肌酸激酶同工酶检测试剂盒。该试剂盒包括第一试剂、第二试剂。第一试剂包含缓冲液、防腐剂、增凝剂、表面活性剂、保护剂、阻断剂；第二试剂包含缓冲液、稳定剂、防腐剂、保护剂、聚苯乙烯胶乳颗粒、肌酸激酶同工酶抗体。

发明内容

基于上述背景技术，现有技术尚未关注试剂盒在存储过程中的稳定性问题。本发明所要解决的技术问题在于一种肌酸激酶同工酶测定试剂盒，其目标在于提高试剂盒的长期稳定性。为了实现本发明的发明目的，拟采用如下技术方案：

本发明一方面涉及肌酸激酶同工酶测定试剂盒，包括第一试剂和第二试剂，其特征在于：