[发明专利]一株产尿素细菌菌株及其在烟草栽培中的应用

说明书

本发明公开了一株产尿素细菌菌株及其在烟草栽培中的应用，该菌株为短短芽孢杆菌Brevibacillus brevis；保藏名称为短短芽孢杆菌Brevibacillus brevis PE01菌株；保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏地址是中国.武汉.武汉大学；保藏日期：2020年11月27日；保藏编号:CCTCC NO.M 2020783。本发明利用PE01菌株制备的微生物肥料在烟草栽培中可以替代30％化学肥料而不影响烟叶产量。本发明的利用PE01菌株制备的微生物肥料，具有使用成本低、环保安全、无残留、对人畜安全的特点。

技术领域

本发明涉及生物肥料技术领域，特别涉及一株产尿素细菌菌株及其在烟草栽培中的应用。

背景技术

尿素是目前国际上农业生产中应用最广泛、施用量最大的氮肥品种，约占50％的世界氮肥生产及消费市场。然而，长期过量施用氮肥导致土壤结构恶化、氮肥利用率低，还会出现过量的氮肥以氨挥发、反硝化、淋洗等途径大量流失，既造成巨大的经济损失，又给生态环境和人类健康带来严重的危害(Nosengo，2003)。生物源尿素主要来自哺乳动物、两栖动物以及水生浮游生物、鱼类、异养细菌等(Solomon et al，2010)，海洋沉积物中的尿素主要是细菌产生的(Pedersen et al.，1993)。Escherichia coli、Fragilartacrotonensis、Micrococcus denitrificans、Sporosarcina ureae等细菌可产生尿素(Perozich et al.，1998)。

本发明人在前期工作中发现，利用产尿素细菌做成的微生物肥料不仅可以促进烤烟的生长，对烟叶品质提升效果也相当显著；尽管其促生机制尚不清楚，利用产尿素细菌替代化学肥料在烤烟栽培中有重要的应用价值。相对于来自土壤、水体等其它生境的细菌，植物内生菌在根际土壤和植物体内的定殖更有优势。为此，本发明人从烟草内生菌中筛选高产尿素的细菌，为开发针对烟草种植的微生物菌剂及其应用奠定基础。本发明人发现从烟草内生菌中分离到的短短芽孢杆菌(Brevibacillus brives)PE01菌株高产尿素，利用PE01菌株制备的菌剂提升烟叶产量显著，而该细菌的产尿素特性及其在烟草栽培中的应用未见报道。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术之不足，本发明的目的是提供一株成本低、环保安全的产尿素细菌菌株及其在烟草栽培中的应用。

本发明的技术方案如下：本发明提供了如下技术方案：本发明的一株产尿素细菌菌株，该菌株为短短芽孢杆菌Brevibacillus brevis；保藏名称为短短芽孢杆菌Brevibacillus brevis PE01菌株；保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏地址是中国.武汉.武汉大学；保藏日期：2020年11月27日；保藏编号:CCTCC NO.M 2020783。

进一步地，所述的短短芽孢杆菌Brevibacillus brevis PE01菌株为革兰氏阳性菌。

该菌株在4-45℃的温度范围内生长，最适生长温度32℃；在pH 6.0-10.0的范围内生长，最适生长pH为7.2；耐受NaCl的最高浓度为6.5％(W/V)，利用引物5’-GGT TAC CTTGTT ACG ACT T-3’，5’-AGA GTT TGA TCM TGG CTC AG-3’经PCR扩增该菌株的16S rRNA基因，获得的序列提交到GeneBank公共数据库，其序列号为JF899267，此序列是鉴定该菌株的分子特征依据。

本发明所述的产尿素细菌菌株制备的产尿素细菌菌剂。

进一步地，其活性成分为如下(a)(b)(c)中的至少一种：

(a)所述的产尿素细菌的发酵培养物；

(b)所述的产尿素细菌细胞的超声裂解上清；

(c)所述的产尿素细菌细胞的超声裂解沉淀。