[发明专利]一种用于新型冠状病毒和肿瘤标志物检测的铝超表面在审
申请号: | 202110208852.X | 申请日: | 2021-02-24 |
公开(公告)号: | CN113008816A | 公开(公告)日: | 2021-06-22 |
发明(设计)人: | 朱锦锋;关超恒;李法君;申家情;焦芳菲;王振标 | 申请(专利权)人: | 厦门大学 |
主分类号: | G01N21/31 | 分类号: | G01N21/31;G01N21/01 |
代理公司: | 北京中济纬天专利代理有限公司 11429 | 代理人: | 郑翰伟 |
地址: | 361005 *** | 国省代码: | 福建;35 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 用于 新型 冠状病毒 肿瘤 标志 检测 表面 | ||
1.一种用于新型冠状病毒和肿瘤标志物检测的铝超表面,其特征在于,包括铝超表面芯片、生物试剂,所述铝超表面芯片由上下两层结构复合组成,下层是图案化聚碳酸酯基片(201),上层是铝膜(202),其中图案化聚碳酸酯基片(201)上有镍模压印形成的周期性纳米柱阵列,所述周期性纳米柱阵列直径为250nm,周期为500nm;所述铝膜(202)厚度为100-200nm,所述生物试剂包括3-氨丙基三乙氧基硅烷、戊二醛、捕获蛋白、待测蛋白,所述捕获蛋白包括:新型冠状病毒单抗F1208、新型冠状病毒单抗F1209、抗牛血清蛋白、抗癌胚抗原、抗甲胎蛋白、抗糖类抗原19-9、抗β2微球蛋白、抗肿瘤坏死因子、抗前列腺特异性抗原、抗人绒毛膜促性腺激素、抗甲胎蛋白、抗神经元特异烯醇化酶、抗糖类抗原242、抗糖类抗原125、抗糖类抗原50、抗糖类抗原153、抗铁蛋白。
2.根据权利要求1所述的一种用于新型冠状病毒和肿瘤标志物检测的铝超表面,其特征在于,所述铝膜(202)的优选厚度为150nm。
3.根据权利要求1所述的一种用于新型冠状病毒和肿瘤标志物检测的铝超表面,所述待测蛋白包括:新型冠状病毒、新型冠状病毒RBD蛋白、牛血清蛋白、癌胚抗原、甲胎蛋白、糖类抗原19-9、β2微球蛋白、肿瘤坏死因子、前列腺特异性抗原、人绒毛膜促性腺激素、甲胎蛋白、神经元特异烯醇化酶、糖类抗原242、糖类抗原125、糖类抗原50、糖类抗原153、铁蛋白,所述待测蛋白由上述捕获蛋白中的一种或几种组合组成。
4.根据权利要求1、2、3所述的一种用于新型冠状病毒和肿瘤标志物检测的铝超表面,其特征在于,包括其制作方法,制作方法步骤如下:
步骤一:纳米压印,在150℃的温度和40bar的压力下,采用热纳米压印技术对IPS进行处理,形成周期纳米柱阵列;
步骤二:等离子刻蚀,采用0-425s的刻蚀时间,将步骤一中的周期性纳米柱阵列采用氧等离子刻蚀,将纳米柱阵列刻蚀为纳米凸起;
步骤三:金属层沉积,采用电子束蒸发或磁控溅射在步骤二形成的所述纳米凸起上蒸镀50-200nm铝膜(202);
步骤四:表面钝化,在氧等离子刻蚀机处理20-30分钟,使铝表面形成一层致密三氧化二铝氧化层,提升器件稳定性。
5.根据权利要求1、2、3所述的一种用于新型冠状病毒和肿瘤标志物检测的铝超表面,其特征在于,包括其检测方法,检测步骤如下:
步骤一:形成氨基自组装层,配制10%的3-氨丙基三乙氧基硅溶液,将所述铝超表面置于室温27℃和潮湿环境下,在3-氨丙基三乙氧基硅溶液中孵育30-60分钟,从而在铝超表面表面上形成氨基自组装层,并用去离子水清洗和氮气干燥处理;
步骤二:活化氨基,配制5%的戊二醛溶液,然后将所述铝超表面置于室温27℃和潮湿环境下,放在5%的戊二醛溶液孵育30-60分钟,将氨基活化;
步骤三:固定捕获蛋白,用10-100ug/mL捕获蛋白溶液孵育30-60分钟,使捕获蛋白与表面的氨基结合,从而固定捕获蛋白;
步骤四:检测待测蛋白,将所述铝超表面在待测蛋白溶液中孵育30-60分钟,采用光谱仪检测计算谱线偏移量。
6.根据权利要求5所述的一种用于新型冠状病毒和肿瘤标志物检测的铝超表面,其特征在于,所述待测蛋白为新型冠状病毒RBD蛋白时,所述铝超表面分别测试了浓度为100ng/mL、10ng/mL、1ng/mL、0.1ng/mL、0.01ng/mL待测溶液,分别产生6.42nm、5.81nm、4.20nm、2.56nm、0.58nm偏移量。
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