[发明专利]一种薄层色谱的构建方法和同时鉴定金银花和甘草成分的方法及其应用

说明书

本发明属于中药检测技术领域，具体涉及一种薄层色谱的构建方法和同时鉴定金银花和甘草成分的方法及其应用，该薄层色谱的构建方法采用四妙勇安汤供试品制备供试品溶液，对供试品溶液进行薄层色谱检测，该方法能够同时将供试品溶液中的甘草成分和金银花成分很好的展开，分离度高，斑点多且清晰不聚集，色谱信息全面，且不受阴性干扰，因此，制得的薄层色谱可用于同时鉴别甘草成分和金银花成分，使得鉴别过程快速方便、鉴别结果准确可靠。

技术领域

本发明属于中药检测技术领域，具体涉及一种薄层色谱的构建方法和同时鉴定金银花和甘草成分的方法及其应用。

背景技术

随着人民群众健康保健意识的增强，对中成药产品的质量和安全性等有了更高的要求。四妙勇安汤由金银花、玄参、当归、甘草四味药物组成。用于脱疽(即血栓闭塞性脉管炎)，证见患处黯红，微热微肿，痛甚，烦热口渴，或则溃烂，脓水淋漓，舌红脉数等。功效清热解毒，活血止痛。

薄层色谱是将样品溶液用管口平整的毛细管滴加于离薄层板一端约1cm处的起点线上，晾干或吹干后置薄层板于盛有展开剂的展开槽内。待展开剂前沿离顶端约1cm附近时，将色谱板取出，干燥后喷以显色剂，或在紫外灯下显色，得到的色谱图。薄层色谱法(TLC)，系根据样品的比移值(Rf)与适宜的对照物按同法所得的色谱图的比移值(Rf)作对比，用以进行药品的鉴别、杂质检查或含量测定的方法，具有操作简单、快速、成本低廉的优点，在中药产品成分鉴定和质量检测中均有广泛使用。

目前四妙勇安汤中有效成分如何鉴别还未见标准颁布，现有的四妙勇安汤的鉴别方法一般采用绿原酸的含量为指标，然而采用单一成分不能全面反映中药制剂内在的化学成分和种类，进而反映中药质量。例如蒋建勤等公开了一种四妙勇安汤中绿原酸的含量测定，采用乙酸丁酯-甲酸-水(4:3:3)上层液为展开剂进行薄层色谱鉴别，仅能对金银花进行鉴别，无法同时鉴别甘草或者其他药材成分，方法也较繁琐。

因此，亟需建立一种能够快速、准确且同时鉴定四妙勇安汤复方制剂及物质基准实物中金银花和甘草成分的方法，以保证其质量的均一、稳定、可靠。

发明内容

因此，本发明的目的在于解决现有技术中四妙勇安汤或者其复方制剂无法快速、准确且同时鉴定金银花和甘草成分的问题。

为此，本发明提供了一种薄层色谱的构建方法，包括如下步骤：

四妙勇安汤供试品溶液的制备：取四妙勇安汤供试品、水与正丁醇混合，固液分离，取液体，得到供试品溶液；

对供试品溶液进行薄层色谱检测，即得供试品的薄层色谱。

在某些优选的实施方式中，薄层色谱检测采用乙酸丁酯-甲酸-水的上层液为展开剂，尤其是采用体积比为5-10：2.5：2.5-7.5的乙酸丁酯-甲酸-水的上层液为展开剂。

上层液是指乙酸丁酯、甲酸和水混合，然后置于分液漏斗中混合，静置分层后得上清液即得。

进一步的，薄层色谱检测中，在薄层板上点样供试品溶液，采用的薄层板为硅胶G薄层板；

优选的，薄层板的长度≥10cm，更优选为10-20cm；

优选的，点样体积为3-30μl；更优选为3-10μl。

进一步的，薄层色谱检测中，采用香草醛硫酸溶液或者硫酸乙醇溶液为显色剂。

优选的，采用质量百分数为2％～5％的香草醛的硫酸溶液或体积百分数为10％硫酸的乙醇溶液。

在某些优选的实施方式中，供试品溶液的制备方法包括，取四妙勇安汤供试品、水与正丁醇混合，固液分离，取液体，得到供试品溶液。

进一步的，所述四妙勇安汤供试品的质量与水、正丁醇的体积之比为0.5-1.5：5-15：5。