[发明专利]抗体组合产品及其在新冠肺炎检测中应用

说明书

本发明涉及生物医学领域，具体而言，涉及一种抗体组合产品及其在新冠肺炎检测中应用。本发明所提供的组合产品具有高灵敏度，可识别新型冠状病毒N蛋白，用于开发新冠检测试剂。

技术领域

本发明涉及生物医学领域，具体而言，涉及一种抗体组合产品及其在新冠肺炎检测中应用。

背景技术

冠状病毒(CoVs；冠状病毒科亚科，冠状病毒科，病毒目)是一组高度多样性，有包膜的，正义链，单链RNA病毒，在多种动物中引起不同严重程度的呼吸道，肠道，肝和神经系统疾病，包括人类。冠状病毒分为四个属：α冠状病毒，β冠状病毒(βCoV)，γ冠状病毒和δ冠状病毒。在过去的12年中，出现了两种新型的β-冠状病毒，即严重的急性呼吸道综合症(SARS-CoV)和中东呼吸道综合症(MERS-CoV)，这两种病毒会引起严重的人类疾病。

新型冠状病毒(SARS-CoV-2)同源性与急性呼吸道综合症(SARS-CoV)达到80％以上，其中的两者的结构蛋白Nucleocapsid protein同源性为94.1％，两者的Spike protein同源性为84.1％。感染新型冠状病毒后，人体会在约7天左右会产生针对病毒的IgM抗体，约14天左右会产生病毒的IgG抗体。产生的抗体是一种保护性的抗体，能促进人体从病毒感染中恢复和自愈。

新型冠状病毒IgM抗体的检测，同时结合新型冠状病毒IgG抗体的检测，可以用于辅助诊断新型冠状病毒疾病，是新冠核酸诊断试剂的有效补充。新冠IgM和IgG检测试剂盒的开发，关键在于新型冠状病毒有效抗原的获得。新冠冠状病毒结构蛋白有刺突蛋白(Spike protein，跨膜蛋白，同源三聚体结构，如“冠状”分布于病毒表面，是介导病毒感染细胞的核心组分)、核衣壳蛋白(Nucleoprotein，是新冠病毒结构蛋白中表达丰度最高的组分)、包膜蛋白(Envelope Protein)和膜蛋白(Membrane Protein)，其中根据蛋白的丰度和空间位置，用于IgM和IgG诊断的主要是核衣壳蛋白以及刺突蛋白。但由于核衣壳蛋白的保守性较强，且由于被包裹在病毒内，机体针对其产生的抗体特别是IgM抗体比较晚。因此，新冠抗体诊断试剂特别是IgM抗体诊断，所使用的诊断抗原主要是刺突蛋白的相关片段。

现有的检测新型冠状病毒的方法有两种，其一是核酸检测，主要通过咽、鼻拭子样品提取基因组后，通过特定的探针和引物，使用qPCR的方法进行分析。虽然该方法时病原感染诊断的金标准，但是操作过程繁琐，涉及到基因提取、处理、分析的步骤，操作要求和时间较长。对操作人员操作水平要求较高，而且容易因为样本提取质量的影响等原因而造成假阴性。其二是通过重组表达新型冠状病毒结构蛋白如N抗原或者刺突蛋白，用于检测血液样本中的IgG、IgM或者IgA抗体，以间接指示病毒的感染情况。但是检出时间相对较晚，IgM抗体一般需要在感染的7天后方可出测，IgG抗体一般需要在感染的14天后方可检出。

发明内容

本发明的第一方面涉及一种组合产品，其为两种新型冠状病毒N抗原的抗体或其抗原结合片段的组合，包含N-Ab-01和N-Ab-02；

所述N-Ab-01包含分别为SEQ ID NO:1、2或3所示氨基酸序列的重链互补决定区H-CDR1、H-CDR2、H-CDR3，以及分别为SEQ ID NO:4、5或6所示氨基酸序列的轻链互补决定区L-CDR1、L-CDR2、L-CDR3；

所述N-Ab-02包含分别为SEQ ID NO:7、8或9所示氨基酸序列的重链互补决定区H-CDR1、H-CDR2、H-CDR3，以及分别为SEQ ID NO:10、11或12所示氨基酸序列的轻链互补决定区L-CDR1、L-CDR2、L-CDR3。

可选的，如上所述的组合产品，所述N-Ab-01和N-Ab-02独立的选自鼠源抗体、人-鼠嵌合抗体、人源化抗体或全人抗体。

可选的，如上所述的组合产品，所述N-Ab-01进一步包含：