[发明专利]一种无苯酚的抗酸性菌染色液及其染色方法

说明书

本发明属于医学检测技术领域，公开了一种无苯酚的抗酸性菌染色液及其染色方法。所述抗酸性菌染色液主要由初染液、脱色液和复染液组成；所述初染液包括以下组分：碱性品红染料、乙醇、芳香醇、表面活性剂和水。本发明通过用芳香醇取代苯酚，可避免因染色液中含有苯酚而对人体和环境所造成的危害问题，并且其染色效果不逊色于常规的含苯酚的抗酸性菌染色液。

技术领域

本发明属于医学检测技术领域，尤其涉及一种无苯酚的抗酸性菌染色液及其染色方法。

背景技术

抗酸杆菌又名分枝杆菌，是一类细长的杆菌，因繁殖时有分枝生长趋势而得名。抗酸杆菌的菌体表面有一层类脂或脂质的皮膜而不易着色，但一经着色后，就连酸性的酒精溶液也不易将其脱色。例如常见的结核分枝杆菌就是分枝杆菌的一种，当其感染肺部时会引发肺结核病，会给人们的健康带来极大威胁。因此，临床上可靠的抗酸杆菌鉴定方法对疾病的诊断具有重要意义。

目前世界卫生组织(WHO)推荐的抗酸性菌染色的标准方法有两种，一种是碱性复红法，又称热染法；另一种是荧光染料法，包括金胺O法和金胺O-罗丹明B法，但荧光染料法会受到荧光设备和技术的限制，因而热染法仍是当前涂片染色的首选方法。

热染法主要由初染液(碱性复红染液)、脱色液(酸性酒精溶液)和复染液(亚甲蓝染液)组成，其中碱性复红染液里含有苯酚，苯酚在染液中不仅起到杀菌的作用，还起到了渗透剂和助染剂的作用，是促进碱性复红进入菌体并使染料在菌体内而不易被酸性酒精脱色的关键成分。当加入碱性复红染液并通过加热促染后，碱性复红染料-抗酸菌体就形成了一个牢固的复合物，呈现红色，再用酸性酒精溶液对其进行脱色，除抗酸性菌体以外其他细菌和组织细胞以及背景就会被脱至无色或淡色，最后用亚甲蓝染液进行复染，其他细菌和组织细胞以及背景就会被染上亚甲蓝的蓝色，红色的抗酸菌和蓝色的背景形成了鲜明的对比，以此用来鉴别抗酸性菌。

而苯酚(又名石炭酸、羟基苯)是一种最简单的酚类有机物，呈弱酸，常温下为一种无色晶体，有毒，对皮肤、粘膜有强烈的腐蚀作用，可致人体灼伤，吸入可抑制中枢神经或损害肝、肾功能。对环境有严重危害，可对水体和大气可造成污染。2017年10月27日，世界卫生组织国际癌症研究机构公布的致癌物清单初步整理参考，苯酚在3类致癌物清单中。

基于以上原因，本领域人士迫切希望开发一种无苯酚添加，具有毒性小和染色效果良好特点的抗酸性菌染色液。

发明内容

本发明旨在至少解决上述现有技术中存在的技术问题之一。为此，本发明提出一种无苯酚的抗酸性菌染色液及其染色方法，通过用芳香醇取代苯酚，可避免因染色液中含有苯酚而对人体和环境所造成的危害问题，并且其染色效果不逊色于常规的含苯酚的抗酸性菌染色液。

一种无苯酚的抗酸性菌染色液，主要由初染液、脱色液和复染液组成；所述初染液包括以下组分：碱性品红染料、乙醇、芳香醇、表面活性剂和水。

众所周知，苯酚属于酚类化合物，其官能团为酚羟基，该羟基与苯环直接相连，苯酚表现为弱酸性；而芳香醇中的羟基为醇羟基，该羟基与苯环侧链碳原子相连，不呈酸性。因此苯酚和芳香醇虽然在结构上有所类似，但其化学性质存在较大差别，两者不可等同替换，在现有技术中也并无将芳香醇取代苯酚应用于染色液中的先例。

而本发明创造性的发现：当在抗酸性菌染色液中采用芳香醇替代苯酚，使所制得的碱性复红染液可起到同样的杀菌和助染作用，其染色效果等同于含苯酚的碱性复红染液。同时，相比于会对人体和环境造成严重危害的苯酚，芳香醇的毒性明显更小，消除了传统染液对人体的毒害因素和致癌性，还大大降低了染液对环境和水体的危害。

优选的，按重量百分数计，所述初染液包括以下组分：碱性品红染料1-3％，乙醇25-35％，芳香醇3-13％，表面活性剂1.5-7.5％，余量为蒸馏水。

优选的，所述表面活性剂为非离子表面活性剂。所述非离子表面活性剂选自Tergitol-TMN-3、Tergitol-TMN-6或Tergitol-TMN-10。