[发明专利]基于截短型核酸适配体检测黄体酮的工作电极及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种基于截短型核酸适配体检测黄体酮的工作电极的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括：在电极上进行电沉积纳米金修饰；在所述纳米金修饰后的电极上自组装核酸适配体。

2.根据权利要求1所述的基于截短型核酸适配体检测黄体酮的工作电极的制备方法，其特征在于，所述核酸适配体的序列为：5’-GATTAACATTAGCCCACCGCCCACC-thiol-3’。

3.根据权利要求1或2所述的基于截短型核酸适配体检测黄体酮的工作电极的制备方法，其特征在于，所述“在电极上进行电沉积纳米金修饰”前，还包括：用多壁碳纳米管修饰电极，包括：在电极表面均匀滴涂终浓度为0.5-5mg/mL的羧基化多壁碳纳米管溶液，35-60℃干燥时间20-45min。

4.根据权利要求3所述的基于截短型核酸适配体检测黄体酮的工作电极的制备方法，其特征在于，所述羧基化多壁碳纳米管溶液的溶剂为0.1-2mg/mL的壳聚糖乙酸溶液。

5.根据权利要求1或2所述的基于截短型核酸适配体检测黄体酮的工作电极的制备方法，其特征在于，所述的“在电极上进行电沉积纳米金修饰”，操作包括：将电极放置于HAuCl₄溶液中，以石墨电极为对电极，Ag/AgCl电极为参比电极，在-1.4-0.0V范围内，以扫速0.1V/s扫描15圈，自然晾干，得到纳米金修饰的电极。

6.根据权利要求1或2所述的基于截短型核酸适配体检测黄体酮的工作电极的制备方法，其特征在于，所述的“在所述纳米金修饰后的电极上自组装核酸适配体”的操作包括：将纳米金修饰后的电极置于浓度为2.5-10μM的核酸适配体溶液中，4-35℃下孵育10-25小时后取出，自然晾干。

7.根据权利要求1或2所述的基于截短型核酸适配体检测黄体酮的工作电极的制备方法，其特征在于，在所述纳米金修饰后的电极上自组装核酸适配体之后，还包括：用巯基己醇溶液中孵育，封闭电极上的空白金位点。

8.权利要求1至7任意一项所述的基于截短型核酸适配体检测黄体酮的工作电极的使用方法，其特征在于，包括：

S1：将所述的基于截短型核酸适配体检测黄体酮的工作电极孵育不同浓度的黄体酮溶液，获得不同浓度的黄体酮溶液的电化学信号，构建标准曲线和线性方程；

S2：样品检测及浓度计算：按照与步骤S1相同的孵育操作，将所述基于截短型核酸适配体检测黄体酮的工作电极孵育待检样品，获得待检样品的电化学信号；用待检样品的电化学信号根据步骤S1得到标准曲线和/或线性方程中计算得出待检样品的黄体酮浓度。

9.根据权利要求8所述的基于截短型核酸适配体检测黄体酮的工作电极的使用方法，其特征在于，所述S1中黄体酮溶液的浓度包括：0.5nM、1nM、10nM、50nM、100nM、200nM、400nM、500nM、1000nM；所述黄体酮溶液的溶剂为2％的牛血清白蛋白溶液。

10.根据权利要求8所述的基于截短型核酸适配体检测黄体酮的工作电极的使用方法，其特征在于，获得所述不同浓度的黄体酮溶液和待检样品的电化学信号的具体方法包括：以石墨电极为对电极，Ag/AgCl电极为参比电极，将电极体系与电化学工作站连接，通过交流阻抗法和差分脉冲伏安法在0.5mM[Fe(CN)₆]^3-/4-体系中扫描，记录电化学信号。