[发明专利]一种红参均一性多糖及其提取方法与应用

说明书

本发明公开了一种红参均一性多糖及其提取方法与应用，以红参为原材料，粗提取红参粗多糖；对红参粗多糖提取物，采用DEAE Sepharose^TM Fast Flow柱层析技术提取得到红参多糖RGRP‑1；对红参多糖RGRP‑1，采用Sephacryl^TMS‑300High Resolution柱层析技术提取得到红参均一性多糖RGRP‑1b，红参均一性多糖在肝癌免疫调节抗肿瘤方面的应用。

技术领域

本发明涉及均一性多糖提取领域，特别是一种红参均一性多糖及其提取方法与应用。

背景技术

红参是一种历史悠久的传统中药，近年来，红参的多种生物学活性被广泛研究，主要包括抗炎、心血管效应、减缓细胞衰老、抗氧化和体外抗肿瘤活性。红参是具有很高药用价值的植物，分布于中国长白山和小兴安岭东南部的山区森林地区。红参已在许多国家(例如中国，韩国和日本)用作药用植物数千年。此外，它还包括人参皂苷，聚乙炔，多酚化合物和多糖等多种化学成分，每种成分都是构成免疫调节，抗氧化剂和消炎功能的基本活性成分

红参多糖(Radix Ginseng Rubra polysaccharides,RGRP)是红参的主要生物学活性物质之一，，RGRP的研究逐渐增多，通常包括RGRP的提取分离纯化和生物活性的研究。研究表明许多免疫类多糖可以通过激活免疫细胞，特别是抗原呈递细胞来发挥免疫调节作用。抗原呈递细胞表面有大量的Toll样受体(TLR)，可以识别抗原并激活细胞内信号通路，在先天和适应性免疫反应中至关重要，参与了一些中药多糖的抗肿瘤活性。

传统的多糖的分离提取方法包括水提醇沉法以及酶提取法、超声波辅助提取法、超临界流体萃取法、超高压提取技术微波辅助提取法和双水相萃取等新技术,对其分离原理、处理方式和效果都不相同。

在公开为CN101250234A，名为“一种红参的制备方法”的发明专利中通过取红参或经过70％--100％乙醇溶液提取后的红参药渣，加入溶剂进行提取，得提取液；提取液浓缩，得浓缩液；浓缩液加入75-100％乙醇溶液至适量进行醇沉，得沉淀；沉淀干燥，得红参多糖提取物；

在公开为CN101550197B，名为“一种从红参醇废料种中回收人参多糖的方法”的发明专利中通过将红参根经热水提取，乙醇沉淀，去除蛋白，冷冻干燥得红参多糖；对比文件1和对比文件2中的不足在于：没有用柱层析方法进一步的分离纯化，提取的红参多糖不是均一性多糖，纯度低，未能检测出其分子量和单糖组成；

在“红参多糖的分离纯化及结构分析”中，将红参经水煮醇沉，除蛋白，柱层析后得到相应多糖片段，其不足之处在于：红参多糖不是均一性多糖，没有进行红参多糖生物活性进行探索。

发明内容

本发明的第一目的是提供一种红参均一性多糖。

本发明的第二目的是提供一种红参均一性多糖的提取方法。

本发明的第三目的是探讨红参均一性多糖在肝癌免疫调节抗肿瘤方面的应用。

为实现上述目的，本发明采用以下技术方案：

一种红参均一性多糖，所述均一性多糖RGRP-1b的分子量为10.165kDa，其单糖组成包括有阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、半乳糖醛酸。

进一步，所述均一性多糖RGRP-1b的总多糖含量为：98.37％，蛋白含量为：1.13％，所述单糖组成包括有阿拉伯糖6.31％、半乳糖9.50％、葡萄糖83.15％、半乳糖醛酸1.04％。

进一步，具体步骤如下：

1)以红参为原材料，粗提取红参粗多糖；

2)对红参粗多糖提取物，采用DEAE Sepharose^TM Fast Flow柱层析技术提取得到红参多糖RGRP-1；