[发明专利]构建原位原发肺癌动物模型的方法

说明书

本发明公开了一种原位原发的肺癌肿瘤模型制备方法，属于肿瘤动物模型领域。本发明通过将小鼠肺细胞以特定培养基培养成类器官，再将类器官进行基因编辑，注射回小鼠肺，使其发展成肿瘤。本发明的方法相比基因工程肿瘤动物模型耗时短，成瘤率高；相比移植瘤动物模型，具有肿瘤发生和发展的体内微环境，更接近肺癌最真实的状态。

技术领域

本发明属于肿瘤动物模型领域。

背景技术

肺癌是严重影响人类健康的恶性肿瘤，主要分为非小细胞肺癌(NSCLC,Non-smallcell lung cancer)和小细胞肺癌(SCLC,Small cell lung cancer)，肺癌发病率及死亡率均居所有癌症的首位。

肺癌细胞模型是研究肺癌机制和药物治疗肺癌活性的基础模型，但肺癌细胞模型通常经历了很多代次培养，遗传信息发生偏移，丢失或者增加了某些特定染色体片段。正常组织或者肿瘤都有强烈的异质性，种类单一的细胞系与体内状态差异极大，而且对于某些药物的抗性，基因的影响都不能反应病人的真实情况。

相比之下，动物模型更能接近肺癌的真实情况，但是，现有的肺癌动物模型存在各种各样的问题。

皮下移植模型，需要在免疫缺陷鼠皮下移植大量的肿瘤细胞系，细胞系本身就很难表征病人肿瘤特征，皮下肿瘤更是不能反应肺组织生态。人源异种移植瘤模型(PDX，patient derived Xenograft model)除了移植在皮下的弊端以外，由于病人本身的差异，标本取材的差异，导致该模型的成功率很大程度上取决于标本本身，而且重度免疫缺陷鼠的饲养成本太高，难度很大。原位移植模型由于小鼠肺纤细，手术难度非常大，监测肿瘤形成需要特殊设备，但是该模型可以模拟肺肿瘤的生态环境。基因鼠模型的背景非常明晰，成瘤的位置也完全有可能在肺原位，但是成瘤概率较低，容易造模前死亡，成本非常高，基因鼠制备繁殖周期太长。致癌物质诱导模型是最古老的一种肺癌模型，很大程度上取决于小鼠的基因背景，该模型其实很难模拟病人的肿瘤形成情况。

发明内容

本发明的目的在于提供一种更接近肺癌生物学特性、且制备周期短的原位原发肺癌模型。

为了实现上述发明目的，本发明提供了以下技术方案：

一种肺类器官培养方法，包括如下步骤：

将肺细胞Matrigel混合，待Matrigel凝固后，加入类器官培养基进行培养，即可：

所述培养基是DMEM/F12，加上如下添加剂得到：