[发明专利]一种检测米酵菌酸的试纸条及方法

说明书

本发明公开了一种检测米酵菌酸的试纸条及方法。该试纸条包括样品吸收垫、结合物释放垫、反应膜、吸水垫和底板，所述反应膜上具有包被有米酵菌酸半抗原‑载体蛋白偶联物的检测线和包被有羊抗鼠抗抗体的质控线，所述结合物释放垫上喷涂有米酵菌酸单克隆抗体‑胶体金标记物。本发明还提供一种应用上述试纸条检测食品中米酵菌酸的方法。本发明提供的试纸条具有操作简单、灵敏度高、检测速度快、成本低、适于大批量样本筛查等优点，能够满足我国食品监管部门开展现场监控和检测工作。

技术领域

本发明涉及一种检测米酵菌酸的试纸条及方法，具体涉及一种用于检测米酵菌酸的胶体金试纸条，其特别适用于银耳、酵米面等食品中米酵菌酸的检测。

背景技术

米酵菌酸(bongkrekic acid，BA)是由椰毒假单胞菌属酵米面亚种产生的一种可引起食物中毒的毒素。食入该毒素污染的食物后可引起神经系统、消化系统及泌尿系统的损伤，严重情况下将导致全身主要脏器的衰竭，致死率高达40％～100％。米酵菌酸是发酵玉米面制品、变质鲜银耳及其他变质淀粉类制品引起中毒的主要原因。随着经济社会的发展，人们对食品安全越来越重视，公众对米酵菌酸的检测需求随之日益增长。

目前，检测米酵菌酸主要采用高效液相色谱法、液相色谱-质谱联用法等分析方法，这些方法均须在实验室条件下操作，样品前处理繁琐费时，还需配备昂贵的仪器设备，检测成本较高、耗时长、操作复杂，在实际应用过程中有很大的限制性，难以满足大量样品和现场样品快速检测的需要。因此，开发一种简单快速、适用于食品中米酵菌酸检测的胶体金试纸条，可满足大量样品现场筛选和监控，能够更好地满足我国食品监管部门等开展检测工作。

发明内容

本发明的目的在于提供一种能够检测食品中米酵菌酸的胶体金试纸条，并且提供一种高效、准确、简便、适于现场监控和大量样本筛查的检测方法。

本发明所提供的检测米酵菌酸的试纸条，包括样品吸收垫、结合物释放垫、反应膜、吸水垫和底板；所述反应膜上具有包被有米酵菌酸半抗原-载体蛋白偶联物的检测线和包被有羊抗鼠抗抗体的质控线；所述结合物释放垫上喷涂有米酵菌酸单克隆抗体-胶体金标记物。

所述米酵菌酸单克隆抗体是以米酵菌酸半抗原-载体蛋白偶联物作为免疫原制备获得。

所述米酵菌酸半抗原-载体蛋白偶联物由米酵菌酸半抗原与载体蛋白偶联得到，所述载体蛋白为牛血清白蛋白、卵清蛋白、血蓝蛋白、甲状腺蛋白或人血清白蛋白，所述米酵菌酸半抗原是通过米酵菌酸与4,5-二甲基-[1,3]二氧戊环-2-硫酮进行反应得到，其分子结构式为：

所述样品吸收垫、结合物释放垫、反应膜、吸水垫依次粘贴在底板上，所述结合物释放垫1/3～1/2被覆盖于样品吸收垫下。

所述底板可为PVC底板或其他硬质不吸水的材料；所述样品吸收垫可为吸滤纸或滤油纸；所述结合物释放垫可为玻璃棉或聚酯材料；所述吸水垫为吸水纸；所述反应膜可为硝酸纤维素膜或醋酸纤维素膜。

本发明的另一个目的是提供一种制备上述试纸条的方法，其包括步骤：

1)制备喷涂有米酵菌酸单克隆抗体-胶体金标记物的结合物释放垫；

2)制备具有包被有米酵菌酸半抗原-载体蛋白偶联物的检测线和包被有羊抗鼠抗抗体的质控线的反应膜；

3)将1)和2)制备好的结合物释放垫、反应膜与样品吸收垫、吸水垫和底板组装成试纸条。

具体地说，步骤包括：

1)通过米酵菌酸与4,5-二甲基-[1,3]二氧戊环-2-硫酮进行反应，制备米酵菌酸半抗原；

2)将米酵菌酸半抗原与载体蛋白偶联，制备米酵菌酸半抗原-载体蛋白偶联物；