[发明专利]一种利用可充气的微波消解装置快速水解乳制品中蛋白质的方法

说明书

本发明食品检测领域，具体涉及一种利用可充气的微波消解装置快速水解乳制品中蛋白质的方法。所述方法包括以下步骤：将样品混合均匀；取适当样品装入微波消解装置，在所述的样品加入水解试剂，将消解装置密封，充入保护氮气，利用微波消解平台将所述的样品进行加热，消解温度为160℃，保温时间25min。水解结束后，对所述样品进行稀释，过滤，氮吹干燥，富溶，得到所述的蛋白水解液。通过利用本发明的制备方法，整个反应从升温至结束仅需45分钟，较原先传统的食品蛋白质水解方法相比，样品前处理所需的时间仅为十分之一；食品中蛋白质水解效率高，对氨基酸含量测定表明，利用该方法测得的数据平行性良好，测试回收率有良好保证。

技术领域

本发明属于食品检测领域，涉及到蛋白质水解的方法，具体涉及一种利用可充气的微波消解装置快速水解乳制品中蛋白质的方法。

背景技术

三聚氰胺事件的发生给中国的乳品安全敲响的警钟，同是也推动了乳品检测手段的提高，原先利用凯氏定氮法测定牛奶中蛋白质含量的方法虽然快速方便，适用性强，但是无法判断N元素的来源；因此通过蛋白质水解产生氨基酸，随后进行对氨基酸进行测试可以避免误判。

蛋白质的氨基酸组分成分分析是一个相对比较复杂的过程，主要包括多肽完全水解并游离出氨基酸，并对游离的氨基酸进行定量分析。在牛奶分析中，牛奶中氨基酸含量的测定也需要遵照上述步骤，利用盐酸将牛奶中所含的蛋白质水解，分解游离的氨基酸，因此实验中利用合适的条件对牛奶中蛋白质进行水解是保证样品检测准确性的重要步骤，在我国食品安全国家标准中，食品中氨基酸的测定方法中规定，样品再进行分析前需在样品中加入6mol/L盐酸与2-3滴苯酚溶液，将水解管在氮气的保护下的条件下放在温度为110℃电热鼓风恒温箱或水解炉内水解22小时后再进行提取，整个实验反应耗时长，效率低。并且长时间的反应极易造成一些对环境敏感的氨基酸例如蛋氨酸和半光氨酸的损失，增加实验的误差。

利用微波对牛奶中蛋白质进行水解，微波直接作用于样品分子，样品通过直接吸收能量，通过分子振动产生热量从而对蛋白质进行分解。通常来说，实验中水解温度提高10℃，蛋白质水解的速率增加1倍。利用微波对密闭样品进行水解，不仅可以提高反应温度，还可以加快水解速率。但是在国标中方法中，蛋白质水解需要在无氧的条件下进行，才能保证蛋白质水解反应完全，并且降低氨基酸被破坏的风险。传统的微波消解装备虽然可以显著提升蛋白质水解的速率，缩短反应时间，但是无法为反应样品提供惰性气体保护。

发明内容

为了解决“基于传统反应耗时长，反应速度慢，蛋白质在水解过程中容易造成损失；而传统利用微波消解处理样品，反应速度虽然有很大的提升，但是传统的消解罐只能提供密闭条件，但是无法为样品在反应中提供持续惰性气体保护，以满足实验的需求。”的问题，本发明目的在于提供一种工艺简单，反应高效，样品回收率良好的快速乳制品中水解蛋白质的方法。

本发明方法中利用对消解罐进行多次真空并充入惰性气体，对反应进行保护。利用可充气微波消解装置，对蛋白质进行水解，该方法不仅利用微波直接作用在样品上的加热优势，同时克服了传统微波消解不能为样品提供惰性气体保护的劣势，在加速反应的同时(与传统方法相比反应速度加快了10倍)，减少氨基酸的氧化，保证试验的准确度。因此利用可充气微波消解装置进行蛋白质水解，该方法具有样品批处理能力强，反应迅速，满足实验室大批量处理样品的需求。

本发明的技术方案为：

一种利用可充气的微波消解装置快速水解乳制品中蛋白质的方法，包括以下步骤：

(1)将混匀的乳制样品放入微波消解罐，加入盐酸溶液和苯酚溶液或丙酸溶液；

(2)向微波消解罐内充入氮气或抽真空后充入氮气，所述微波消解罐设置有气体进气管和气体放气管，将微波消解罐进气管与氮气气源连接，拧松出气端，缓慢打开氮气气源，赶出消解罐中的空气，4-6分钟后，关闭出气端并拧紧接头，当压力表显示为2MPa时，关闭进气接头、封口；