[发明专利]一种基于荧光RMA法多重检测肠道致病菌的引物探针组、试剂盒及其检测方法在审
申请号: | 202110224757.9 | 申请日: | 2021-03-01 |
公开(公告)号: | CN112760395A | 公开(公告)日: | 2021-05-07 |
发明(设计)人: | 刘建生;陈大为;陈龙;张瑶 | 申请(专利权)人: | 济南国益生物科技有限公司 |
主分类号: | C12Q1/689 | 分类号: | C12Q1/689;C12Q1/6844;C12Q1/04;C12Q1/10;C12N15/11;C12R1/42;C12R1/01;C12R1/63 |
代理公司: | 济南信在专利代理事务所(特殊普通合伙) 37271 | 代理人: | 殷盛江 |
地址: | 250100 山东省济南*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 基于 荧光 rma 多重 检测 肠道 致病菌 引物 探针 试剂盒 及其 方法 | ||
1.一种基于荧光RMA法多重检测沙门氏菌、志贺氏菌、副溶血弧菌的引物探针组,其特征在于,包括检测沙门氏菌的引物和探针、检测志贺氏菌的引物和探针、以及检测副溶血弧菌的引物和探针,其中:
(1)沙门氏菌引物和探针序列为:
上游引物:
5’-GAGGGCCTGGACGATAACAGCATCGTATTGTTG-3’;
下游引物:
5’-AATCAGGAAATTTCGCTTCCAGTTGGTCCAGCA-3’;
探针:
5’-AGAGGGGGAGAAACTCCGGGAGCTTGGCTATG(FAM-dT)G(THF)(BHQ1-dT)GCGGAACGCGCTTGA(C3-spacer)-3’。
(2)志贺氏菌引物和探针序列为:
上游引物:
5’-AGGCAATTCAGGCAAGACAGTAAGGCGATTACC-3’;
下游引物:
5’-ATTGAGAACAGGCTCCCGGGTATCCAGACAT-3’;
探针:
5’-TGATGGAAGCTCTGGTAACGTCTCCAGAC(JOE-dT)A(THF)(BHQ1-dT)AAAACGTGCCGAGAGT(C3-spacer)-3’。
(3)副溶血弧菌引物和探针序列为:
上游引物:
5’-TTCATGTTGATGACACTGCCAGATGCGACGA-3’;
下游引物:
5’-AATCGACAGACGATGAGCGGTTGATGTCCAAAC-3’;
探针:
5’-AGACGCTAACTTCTGCGCCAGAAGAGCACGG(CY5-dT)(THF)(BHQ2-dT)CGTGAACGCAAGTGA(C3-spacer)-3’。
2.如权利要求1所述的一种基于荧光RMA法多重检测沙门氏菌、志贺氏菌、副溶血弧菌的引物探针组,其特征在于,所述沙门氏菌的检测探针上标记的荧光报告基团是FAM,荧光淬灭基团是BHQ1;所述志贺氏菌的检测探针上标记的荧光报告基团是JOE,荧光淬灭基团是BHQ1;所述副溶血弧菌的检测探针上标记的荧光报告基团是CY5,荧光淬灭基团是BHQ2。
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