[发明专利]一种五香粉中植物源性成分鉴别方法

权利要求书

1.一种鉴定五香粉中植物源性物种成分的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：

(a)提供一待测样品；

(b)从所述样品中提取基因组DNA；

(c)用带有碱基标签的ITS2和psbA-trnH基因通用引物对(b)中所述基因组DNA进行多重PCR扩增，得到PCR扩增产物；

(d)对所述PCR扩增产物进行纯化、定量检测；

(e)用上一步骤中检测合格的PCR扩增产物构建测序文库并进行质量检验；

(f)对上一步测序文库进行高通量测序，获得ITS2和psbA-trnH基因片段序列；

(g)将上一步所得ITS2和psbA-trnH基因片段序列与本地ITS2和psbA-trnH基因序列数据库和/或公共数据库进行比对，根据测序序列与数据库中参考序列的同源性确定五香粉样品中的物种成分。

其中，在步骤(g)中，若待测五香粉扩增所得ITS2和/或psbA-trnH基因片段某条测序序列与本地ITS2和psbA-trnH基因序列数据库和/或公共数据库中某一植物的某条序列一致性大于等于97％，则所述待测五香粉中含有该条序列在数据库中所对应的植物物种；若待测五香粉扩增所得ITS2和/或psbA-trnH基因片段某条测序序列与本地ITS2和psbA-trnH基因序列数据库和/或公共数据库中某一植物的某条序列一致性小于97％，则所述待测五香粉中不含有或候选不含有该条序列在数据库中所对应的植物物种。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述五香粉样品为一类将多种香辛料按一定比例混合而成的复合粉状调味料。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤(c)中所述多重PCR反应分1个或多个反应体系完成。

4.如权力要求1所述的方法，其特征在于，所述方法设置阳性对照组。

5.如权力要求1所述的方法，其特征在于，在步骤(g)中生物信息学分析中分类学单元聚类(OTU)的阈值为97％；只有在至少2个重复中均检测到该物种时，才认为该物种存在于样品中；对于标签中未标注的物种，当物种相对丰度高于0.2％时，才认为存在于样品中。