[发明专利]一种SDF-1诱导兔膝骨关节炎模型构建及其效果评估方法在审
申请号: | 202110228926.6 | 申请日: | 2021-03-02 |
公开(公告)号: | CN112986242A | 公开(公告)日: | 2021-06-18 |
发明(设计)人: | 李彦林;向耀宇;何映红;王坤;王国梁;蔡国锋 | 申请(专利权)人: | 昆明医科大学第一附属医院 |
主分类号: | G01N21/84 | 分类号: | G01N21/84;G01N1/28;G01N1/30;G01N1/36;G01N1/44;A61D1/00 |
代理公司: | 湖南楚墨知识产权代理有限公司 43268 | 代理人: | 麦振声 |
地址: | 650000 云*** | 国省代码: | 云南;53 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 sdf 诱导 骨关节炎 模型 构建 及其 效果 评估 方法 | ||
1.一种SDF-1诱导兔膝骨关节炎模型构建方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)准备已消毒好的动物剃毛机、不同型号注射器、手术包、2-0慕斯缝线;
(2)取试验兔,进行无菌麻醉操作;
(3)清理手术部位,切断前交叉韧带、后交叉韧带、内侧副韧带以及切除内侧半月板,打开关节腔;
(4)在右膝关节关节腔定位点点穿刺,按照体重向相应关节腔内注射10-40ug/kg的SDF-1溶液,完成第1天的注射操作;
(5)依照步骤(4)于第3天、第5天重复上述操作;
(6)冲洗关节腔,膝关节复位,逐层缝合手术切口,Ⅰ型碘冲洗术口,无菌敷料覆盖;
(7)手术后3天按照2万单位/kg连续每日注射青霉素,隔日换药1次观察伤口愈合情况,常规饲养。
2.根据权利要求1所述的一种SDF-1诱导兔膝骨关节炎模型构建方法,其特征在于,所述步骤(2)严格无菌操作,将10%水合氯醛以1mL/kg为单位进行耳缘静脉注射麻醉。
3.根据权利要求1所述的一种SDF-1诱导兔膝骨关节炎模型构建方法,其特征在于,所述步骤(3)将麻醉完成后的试验兔固定在动物手术台上,剃毛机剔除后肢体表兔毛,暴露手术部位,无菌棉球蘸Ⅰ型碘消毒3遍。
4.根据权利要求1所述的一种SDF-1诱导兔膝骨关节炎模型构建方法,其特征在于,所述步骤(3)将试验兔固定后,右膝关节消毒,铺无菌洞巾后,用手术刀在右侧后肢膝关节正中处切长3cm皮肤切口,暴露髌骨、髌腱、肌肉组织,沿髌骨及髌腱内侧做纵行切口,打开关节腔,膝关节屈曲,将髌骨外翻,充分暴露关节腔;生理盐水冲洗手术视野,将前交叉韧带、后交叉韧月板、内侧副韧带切断,完成关节腔的打开操作。
5.根据权利要求1-4任意一项所述的一种SDF-1诱导兔膝骨关节炎模型构建效果的评估方法,其特征在于,完成兔膝骨关节炎模型构建的试验兔在饲养第4周、8周、12周,分别获取关节液及软骨标本,制作软骨组织石蜡切片,进行软骨组织HE染色和免疫组化检测,评估模型构建的效果。
6.根据权利要求5所述的一种SDF-1诱导兔膝骨关节炎模型构建效果的评估方法,其特征在于,所述的获取关节液及软骨标本步骤包括:
(1)用1mL注射器抽取右膝关节液,放入1mL离心管中,液氮冻存备用;
(2)按照所述步骤(3)的方法打开关节腔,暴露手术视野,大体观察股骨髁和胫骨平台情况;
(3)切取股骨内侧髁前1/2软骨及软骨下骨,且不损伤关节面,放入4%甲醛溶液中备用;
(4)切取剩余软骨,一部分放入液氮中冻存备用,另一部分放入装有RNA冻存液的离心管中冷藏过夜,再转移到液氮中冻存。
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