[发明专利]一种红树内生真菌中二苯甲酮类化合物及其制备方法与应用

说明书

本发明涉及一种红树内生真菌中二苯甲酮类化合物及其制备方法与应用，具体涉及2个二苯甲酮类化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于所述二苯甲酮类化合物具有化合物1、2所示的结构：

技术领域

本发明属于红树内生真菌次级代谢产物领域，具体涉及一种红树内生真菌中二苯甲酮类化合物及其制备方法与应用。

背景技术

海洋来源的内生真菌是结构新颖活性独特的化合物重要来源之一。近年来，一些新的活性化合物已经从真菌Penicillium citrinum中分离得到，例如：细胞毒的化合物penibenzophenones A和B，抗植物病原菌的化合物citrinin和emodin，具有α-Glucosidase活性的化合物penicimarin J和penicimarin K，抗真菌化合物penicitrinone A和penicitrinol J。本发明提供一种红树内生真菌Penicillium citrinum HL-5126中二苯甲酮类化合物及其制备方法与应用。

发明内容

本发明提供一种红树内生真菌来源的二苯甲酮类化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于所述二苯甲酮类化合物具有化合物1、2所示的结构：

本发明的另一实施方案提供一种同时制备上述化合物1和2的制备方法，其特征在于包括如下步骤：

(1)配制种子培养基，将Penicillium citrinum HL-5126菌株接入种子培养基中，28℃，培养3～4天得种子培养液；

(2)将步骤(1)得到的种子培养液接入发酵培养基中，26～28℃摇床培养28天得发酵物；

(3)将步骤(2)得到的发酵物中的发酵液和菌体分离，发酵液用等体积的乙酸乙酯萃取3～5次，合并萃取液后减压浓缩得到浸膏；

(4)步骤(3)得到的浸膏经过减压硅胶柱层析，采用石油醚-乙酸乙酯按100:0、90:10、80:20、70:30、60:40，50:50、40:60、30:70、20:80、10:90、0:100梯度洗脱，每个梯度收集两个柱体积，合并40:60梯度洗脱得到的馏分、浓缩后经Sephadex LH-20凝胶柱层析，洗脱剂为石油醚:乙酸乙酯＝1:1，再经高效液相色谱HPLC制备，色谱柱为Agilent C18,9.4×250mm，7μm，流速为2mL/min，流动相为CH₃CN:H₂O＝35:65，最终得到化合物1；合并20:80梯度洗脱得到的馏分、浓缩后经Sephadex LH-20凝胶柱层析，洗脱剂为石油醚:乙酸乙酯＝1:3，再经高效液相色谱HPLC制备，色谱柱为Agilent C18,9.4×250mm，7μm，流速为2mL/min，流动相为MeOH:H₂O＝45:55，最终得到化合物2。

其中所述洗脱剂或流动相的比例均为体积比；所述种子培养基中含有葡萄糖1.5％–3.0％、酵母膏0.1％–0.5％、蛋白胨0.1％–0.5％、粗海盐0.11％–0.6％、适量的水；所述发酵培养基中含有葡萄糖1.6％–3.5％、酵母膏0.1％–0.5％、蛋白胨0.1％–0.5％、粗海盐0.11％–0.6％、适量的水；上述百分比均为重量百分比；所述种子培养基和发酵培养基均需120℃灭25–30分钟。

步骤(2)中摇床培养转速优选150-180r/min。

本发明提供一种药物组合物，其特征在于以本发明上述化合物1、2或其药学上可接受的盐作为活性成分。

本发明提供一种神经元保护药物组合物，其特征在于以本发明上述化合物1、2或其药学上可接受的盐作为活性成分。

本发明提供一种预防和/或治疗脑卒中的药物组合物，其特征在于以本发明上述化合物1、2或其药学上可接受的盐作为活性成分。