[发明专利]一种秋石斛兰花芽组织培养快速繁殖的方法

说明书

本发明公开了一种秋石斛兰花芽组织培养快速繁殖的方法，包括如下步骤：(1)外植体的选择与消毒：(2)丛生芽的诱导培养；(3)丛生芽的增殖培养；(4)生根培养；(5)试管苗移栽；其中，所述步骤(1)中外植体的选择与消毒具体过程为：选择长势旺盛的秋石斛兰健康母株为外植体对象，在前一年对秋石斛兰健康母株枝条进行打顶摘心，并在当年上述秋石斛兰健康母株枝条的隐芽位置处涂抹赤霉素溶液进行催芽；待隐芽被催至萌芽且生长至1‑2cm、新芽具3‑5个节时进行取样；经消毒后切取带节茎段和茎尖作为外植体，备用；步骤(3)丛生芽的增殖培养中，增殖培养和继代增殖培养的培养周期均为25‑35d。该方法可以提高繁殖速度，便于高效和规模化组培生产。

技术领域

本发明涉及组织培养快速繁殖技术领域，特别涉及一种秋石斛兰花芽组织培养快速繁殖的方法。

背景技术

秋石斛兰，为常绿类石斛，为兰科石斛兰属植物，又称蝴蝶石斛、杜兰、石斛、石兰等。秋石斛兰是是近几年在中国插花市场上流行的花卉，种类繁多，花形花姿优美，色彩艳丽，花期长，具有较高的观赏价值，在国内切花和盆花的市场需求量逐年增加，对优质种苗的需求迫切。

目前，国内外对秋石斛兰快速繁殖技术的研究，主要集中在利用茎芽作外植体繁殖分生苗或种子萌发获得实生苗。但利用茎芽作外植体极易造成褐化且污染的发生率较高，而用种子培育的秋石斛兰后代性状分离程度高，个体之间差异大，难以实现性状一致的植株。

申请号为CN200410077729.5、名称为一种“秋石斛兰优质种苗组织培养快速繁殖方法”的中国专利中，提出了以秋石斛兰种质新芽为外植体，采用培养基进行丛生芽增殖并获得种苗；该方法建立了以秋石斛兰的种质新芽为外植体的繁殖技术，但增殖效率与移栽成活率仍然不够理想，并存在着操作过程相对较为繁复的缺陷。

申请号为CN201710282269.7、名称为“一种秋石斛兰种苗的组织培养快速繁殖方法”的中国专利中，提出了一种增殖后无需进行壮苗培养即可进行后续的生根培养的繁殖方法，该发明方法克服了现有技术中秋石斛兰种苗培养操作过程相对较为繁复、效率低、组培苗抗性差，移栽成活率低的缺陷。但是该繁殖方法中，丛生芽的单词增殖培养仍然需要较长的培养周期，导致繁殖速度慢，不利于进行规模化组培。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种秋石斛兰花芽组织培养快速繁殖的方法，提高繁殖速度，便于高效和规模化组培生产。

为了解决上述技术问题，本发明的技术方案为：

一种秋石斛兰花芽组织培养快速繁殖的方法，该方法包括如下步骤：

(1)外植体的选择与消毒；

(2)丛生芽的诱导培养：取步骤(1)消毒后的外植体，接种到丛生芽诱导培养基中进行丛生芽诱导培养；

(3)丛生芽的增殖培养：将步骤(2)诱导获得丛生芽切割成带3-6个小芽的丛芽团，接着把丛芽团接种到增殖培养基中进行增殖培养；之后更换新的增殖培养基进行继代增殖培养1-2次，然后继续培养10-15d，得健壮丛生芽；

(4)生根培养：将步骤(3)获得的健壮丛生芽切割成单芽，并接种于生根培养基上进行培养；

(5)试管苗移栽：将步骤(4)获得的瓶苗进行炼苗后，移栽；

特别的，所述步骤(1)中外植体的选择与消毒具体过程为：选择长势旺盛的秋石斛兰健康母株为外植体对象，在前一年对秋石斛兰健康母株枝条进行打顶摘心，并在当年上述秋石斛兰健康母株枝条的隐芽位置处涂抹赤霉素溶液进行催芽；待隐芽被催至萌芽且生长至1-2cm、新芽具3-5个节时进行取样；经消毒后切取带节茎段和茎尖作为外植体，备用。

所述步骤(3)丛生芽的增殖培养中，增殖培养和继代增殖培养的培养周期均为25-35d。