[发明专利]一种脂肪干细胞冻存液及其应用

说明书

本发明提供了一种脂肪干细胞及其应用，属于干细胞冻存技术领域。本发明所提供的脂肪干细胞冻存液包括40%DMEM/F12，50%FBS，10%DMSO，100‑250μM肛褶蛙肽。使用本发明提供的冻存液所长期冻存的脂肪干细胞具有更好的活性和成脂转化能力，而且使用本发明所提供的冻存液能够有效的降低长期冻存的脂肪干细胞的凋亡。

技术领域

本发明属于干细胞冻存技术领域，尤其涉及一种脂肪干细胞冻存液及其应用。

背景技术

干细胞治疗是生物材料科学和组织工程技术相结合的新型治疗方式。常见的干细胞包括：骨髓间充质干细胞，脂肪间充质干细胞，脐带间充质干细胞和外周血间充质干细胞。脂肪间充质干细胞由于更易获得，因此是组织工程中理想的干细胞来源。研究表明，脂肪间充质干细胞不仅具有很强的增殖和分化能力，而且能行向脂肪，骨，软骨，神经，肌肉等方向分化。目前，脂肪间充质干细胞的复苏效率一般不高，该问题严重制约着脂肪间充质干细胞的临床转化和基础研究。因此，制备有效的冻存液来减少冻存过程中脂肪间充质干细胞的损伤对于脂肪干细胞治疗具有重要意义。

发明内容

本发明的目的在于提供一种脂肪干细胞冻存液及其应用。

为实现上述目的，本发明提供了一种脂肪干细胞冻存液，所述冻存液包括如下组分：40% DMEM/F12，50% FBS，10% DMSO，肛褶蛙肽。

优选地，所述冻存液包括如下组分：40% DMEM/F12，50% FBS，10% DMSO，100-250μM肛褶蛙肽。

优选地，所述冻存液包括如下组分：40% DMEM/F12，50% FBS，10% DMSO，200μM 肛褶蛙肽。

优选地，所述肛褶蛙肽的氨基酸序列为Asp-Val-Pro-Lys-Ser-Asp-Gln-Phe-Val-Gly-Leu-Met-NH2。

其次，本发明提供了一种用于脂肪干细胞冻存液的多肽，所述多肽为肛褶蛙肽。

优选地，所述肛褶蛙肽在脂肪干细胞冻存液中用于维持脂肪干细胞活性；

所述肛褶蛙肽在脂肪干细胞冻存液中用于降低脂肪干细胞凋亡；

所述肛褶蛙肽在脂肪干细胞冻存液中用于维持脂肪干细胞成脂分化能力。

其次，本发明提供了肛褶蛙肽在制备脂肪干细胞活性维持剂中的应用。

其次，本发明提供了肛褶蛙肽在制备脂肪干细胞凋亡抑制剂中的应用。

其次，本发明提供了肛褶蛙肽在制备脂肪干细胞成脂分化维持剂中的应用。

优选地，所述肛褶蛙肽的氨基酸序列为Asp-Val-Pro-Lys-Ser-Asp-Gln-Phe-Val-Gly-Leu-Met-NH2。

本发明的有益效果是：

本发明提供的脂肪干细胞冻存液能够在长期冻存环境下有效的维持脂肪干细胞的活性并降低脂肪干细胞的凋亡，同时，使用本发明冻存液长期冻存的脂肪干细胞能够保持更好的成脂转化能力。

附图说明

图1 实施例1和实施例5冻存细胞中Cleaved-Caspase3和Cleaved-Caspase9的表达水平；

图2 实施例1和实施例5冻存细胞的成脂转化能力。

具体实施方式

为能清楚说明本方案的技术特点，下面通过具体实施方式，对本方案进行阐述。

实施例1

（1）按照如下配方配置冻存液A：40% DMEM/F12，50% FBS，10% DMSO；