[发明专利]红花如意丸指纹图谱质量检测方法

说明书

本发明公开了一种红花如意丸指纹图谱质量检测方法，取红花如意丸粉末的无水乙醇溶液，加热回流，冷却，取续滤液；梯度洗脱流动相；高效液相色谱分析不同批次的红花如意丸药物，得各批次药物色谱图，经《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》处理分析，得共有特征对照图谱峰图，根据分离度和样品的重现性从中选取共有峰中的15个峰；获取待检测样品的指纹图谱，用中药指纹图谱计算机辅助相似度评价软件比较两种共有特征对照图谱峰图，15个共有峰计算得到的相似度不小于0.8。该质量检测方法能从色谱的整体面貌上把握红花如意丸的质量情况，可作为红花如意丸质量控制的指标，对今后标准化生产提供可利用的质量控制模式。

技术领域

本发明属于中药制剂检测技术领域，涉及一种中药制剂的指纹图谱构建方法，具体涉及一种治疗妇女血症、风症、阴道炎、宫颈糜烂、心烦血虚、月经不调、痛经、下肢关节疼痛、筋骨肿胀、晨僵、麻木、小腹冷痛及寒湿痹证的藏药红花如意丸药粉、药丸或提取物的指纹图谱质量检测方法。

背景技术

红花如意丸是采用中国青藏高原特有的天然药物精制而成的藏成药，主要功能为祛风镇痛、调经血、祛斑。用于妇女血症、风症、阴道炎、宫颈糜烂、心烦血虚、月经不调、痛经、下肢关节疼痛、筋骨肿胀、晨僵、麻木、小腹冷痛及寒湿痹证，其卓越的功效，是中国特有的精品藏药之一。

目前，红花如意丸的质量控制指标除了测定胡椒的含量外，还对藏木香、熊胆粉进行了薄层鉴别，这样虽能控制红花如意丸的质量，但无法整体掌控质量状况及批间一致性。

发明内容

本发明的目的是提供一种简便、稳定、精密度高、重现性好、易于掌握的红花如意丸指纹图谱质量检测方法。

为实现上述目的，本发明所采用的技术方案是：一种红花如意丸指纹图谱质量检测方法，具体为：

1）供试品溶液的制备：取本品，研细，精密称定（3g），置具塞锥形瓶中，精密加入无水乙醇25mL，密塞，称定重量，加热回流60分钟，自然冷却至室温，再称定重量，用无水乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，得供试品溶液；

所用红花如意丸可以是组方制备的各种丸剂，也可以是按照组方制备的提取物或用原料直接制备的中药细粉或者按照组方制备各种口服临床剂型，如片剂、胶囊、颗粒、缓释制剂等。

2）梯度洗脱流动相：以十八烷基键合硅胶为填充剂；用C-18色谱柱，5μm，4.6mm×250mm；流动相：A相为0.2%磷酸溶液，B相为乙腈；梯度洗脱：0→30min，流速1.00 mL/min，A相90%→70%，B相10%→30%；30→50min，流速1.00 mL/min，A相70%→60%，B相30%→40%；50→70min，流速1.00 mL/min，A相60%→35%，B相40%→65%；70→90min，流速1.00 mL/min，A相35%→20%，B相65%→80%；90→100min，流速1.00 mL/min，A相20%→10%，B相80%→90%；100→120min，流速1.00 mL/min，A相90%，B相10%；

检测波长206nm，柱温25℃，进样量10μL；理论塔板数按胡椒碱峰计，应不低于2500；

3）建立标准药物图谱

选取21批不同批次的红花如意丸药物，根据步骤1）和步骤2）进行高效液相色谱分析，获得每个批次药物的色图谱，如图1，该色谱图经《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》（2012年版本）处理分析，得高效液相色谱指纹图谱的共有特征对照图谱峰图，如图2，根据分离度和样品的重现性从该特征对照图谱峰图中选取共有峰中的15个峰，作为特征峰；该15个特征峰的峰面积总和占总的峰面积的80%以上；

其中，9号峰：保留时间62.060min，为胡椒碱峰；

4）指纹图谱的质量控制