[发明专利]一种提高玉米幼苗低温出苗率及抗氧化酶活性的方法

权利要求书

1.一种提高玉米幼苗低温出苗率及抗氧化酶活性的方法，其特征在于它是按照以下步骤进行的：

步骤一，菌悬液制备

将冻干产酸克雷伯氏菌进行活化培养，取产酸克雷伯氏菌培养液接种于LB液体培养基中，28℃、180rpm培养48小时，将菌悬液进行离心后弃上清液，将沉淀用无菌蒸馏水洗涤并重悬，重复3次后，并调配成1×10⁸cfu/mL的菌悬液；

步骤二，芦苇炭制备

将芦苇经水洗去除表面黏附物，风干两天，并在70～80℃烘箱干燥，经粉碎，过0.2mm筛子，置于管式炉中，以10℃/min升温速率至500℃碳化2小时，得芦苇炭；

步骤三，菌炭混合液制备

取步骤一制备的1×10⁸cfu/mL的菌悬液按体积质量比为6～10mL:1g的比例加入步骤二制备的芦苇炭，混合均匀后，在超声波频率为20～30kHz、功率为40～60W/L的条件下进行超声处理15min后静止2h，制备成菌炭混合液；

步骤四，处理盆栽土

将盆栽土壤进行彻底风干，过2mm筛子，置于盆内，然后放入到温度为28℃的培养箱内培养48小时，然后加入菌炭混合液；其中，盆栽土壤与菌炭混合液中的芦苇炭质量比为加入25～35:1，盆栽土壤与菌炭混合液中的产酸克雷伯氏菌液的质量体积比为3～4g:1mL；

步骤五，种子预处理

挑选大小一致、表面无破损的玉米种子，置于步骤一的菌悬液中浸泡吸湿6h，吸湿温度为25℃，再将吸湿后的种子放置在阴凉通风处回干12h；再取步骤一的菌悬液按1:30质量比均匀喷洒在玉米种子表面进行菌剂包衣处理；

步骤六，播种

将步骤四的盆栽土每盆移出三分之一土壤，均匀播种步骤五预处理后的颗种子，在种子上方覆盖移出的土壤；

步骤七，低温培养

将盆栽盆放入光照培养箱，分别在6～16℃培养温度条件下进行培养，每天光照12h，湿度为60％-80％，培养7天，培养期间每隔48小时向各盆栽盆中加无菌水，即完成所述的提高玉米幼苗低温出苗率及抗氧化酶活性的方法；所述的产酸克雷伯氏菌是由中国普通微生物菌种保藏管理中心获取得到的，保藏编号为CGMCC 1.15628。

2.根据权利要求1所述的一种提高玉米幼苗低温出苗率及抗氧化酶活性的方法，其特征在于所述的玉米品种为先玉335。

3.根据权利要求1所述的一种提高玉米幼苗低温出苗率及抗氧化酶活性的方法，其特征在于所述的LB液体培养基配比为：NaCl 10.0g，蛋白胨10.0g，酵母粉5.0g，琼脂20g，蒸馏水1L，pH＝7.0。

4.根据权利要求1所述的一种提高玉米幼苗低温出苗率及抗氧化酶活性的方法，其特征在于步骤一中所述的离心条件为6000r·min^-1离心15min。

5.根据权利要求1所述的一种提高玉米幼苗低温出苗率及抗氧化酶活性的方法，其特征在于所述的管式炉为OTF-1200X-5-III型管式炉。

6.如权利要求1所述的玉米幼苗的应用，其特征在于它用于在低温条件下提高出苗率及抗氧化酶活性的种植。

7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于所述的低温条件为6～16℃。