[发明专利]一种分析磺肽指示剂中杂质的检测方法

说明书

一种分析磺肽指示剂中杂质的检测方法，涉及试剂中杂质的分析方法。称取一定量的磺肽指示剂置于样品瓶中，依次加入超纯水、乙醇，充分混匀，超声，过滤后置于色谱进样瓶中，注入高效液相色谱仪中进行高效液相色谱分析检测。采用高效液相色谱法对磺肽指示剂中杂质进行分析检测，可用于多种磺肽指示剂中杂质情况的考察，选择特征光谱，可直观确定杂质是否会对pH和总碱度的测定造成影响。通过调整溶剂中超纯水和甲醇的比例，尽可能地增加不同类型磺肽指示剂的溶解度，从而更好地对杂质峰进行判断。具有操作简便、快速等优点，可以直观判断出磺肽指示剂中是否含有能够影响pH或总碱度测定结果的杂质。

技术领域

本发明涉及试剂中杂质的分析方法，特别是涉及一种分析磺肽指示剂中杂质的检测方法。

背景技术

近几十年来，大气中的二氧化碳含量逐渐增加，海水吸收了一部分大气中增加的二氧化碳后，海水中的H⁺，HCO₃^-和CO₃^2-浓度不断上升，最终导致海洋酸化。海洋生物的生长发育及其一系列的生理生化反应都依赖于适宜的pH环境，因此海洋酸化的研究对于保护海洋环境具有十分重要的意义。

海水碳酸盐体系的研究一般是基于四个基本参数，pH、总碱度、溶解性无机碳和二氧化碳分压，理论上通过其中任意两个参数就能计算出其它参数。pH和总碱度作为海洋酸化研究中的两个重要参数，其测定的精密度和准确度十分重要。分光光度法因其具有较好的精密度和准确度，常被应用于海洋观测中pH和总碱度的测定；其原理为利用磺肽指示剂在不同条件下颜色的变化，通过特定波长吸光值的测定计算海水的pH和总碱度。当磺肽指示剂中混有的杂质的吸收波长与pH或总碱度的测定波长相同或相近时，可能会对pH或总碱度测定结果的精密度和准确度造成一定影响。然而不同厂家、不同种类甚至不同批次的磺肽指示剂纯度均难以达到100％，指示剂中所含杂质未知且各不相同。因此，为了了解磺肽指示剂所含杂质给海水pH和总碱度测定带来的不确定性，本发明旨在提供一种能够简便、快速地考察磺肽指示剂中杂质情况的方法，为pH和总碱度的准确测定提供参考和帮助。

发明内容

本发明的目的旨在提供简单、快速地考察不同磺肽指示剂中杂质情况的一种分析磺肽指示剂中杂质的检测方法。

本发明包括以下步骤：

1)称取一定量的磺肽指示剂置于样品瓶中，依次加入1～10mL超纯水、0～10mL乙醇，充分混匀，超声1～30min；

2)取步骤1)的样品过滤后置于色谱进样瓶中；

3)取10～50μL步骤2)得到的样品注入高效液相色谱仪中进行高效液相色谱分析检测。

在步骤1)中，所述磺肽指示剂包括百里酚蓝、间甲酚紫、苯酚红、溴甲酚绿、溴甲酚紫等中的至少一种；所述磺肽指示剂的配制浓度可为50～500mmol/L，通过调整超纯水和乙醇的比例，增加不同种类磺肽指示剂的溶解度。

在步骤2)中，所述过滤可采用0.45μm滤膜。

在步骤3)中，所述进行高效液相色谱分析检测时流动相中有机相为甲醇，无机相为添加0.05％三氟乙酸的超纯水，采用等度洗脱程序，有机相比例为20％～80％。

进行高效液相色谱分析检测时采用的色谱柱为C18柱；优选地，色谱柱的型号规格为4.6×250mm，5μm。

进行高效液相色谱分析检测时不同磺肽指示剂的检测波长不同；优选地，百里酚蓝的检测波长为435nm；间甲酚紫的检测波长为434nm；苯酚红的检测波长为433nm；溴甲酚绿的检测波长为444nm；溴甲酚紫的检测波长为433nm。