[发明专利]一种固定化苏氨酸醛缩酶的制备方法、固定化苏氨酸醛缩酶及应用在审
| 申请号： | 202110246526.8 | 申请日： | 2021-03-05 |
| 公开（公告）号： | CN113061600A | 公开（公告）日： | 2021-07-02 |
| 发明（设计）人： | 徐刚;陈开通;郑文隆;吴坚平;杨立荣 | 申请（专利权）人： | 宁波泓森生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N11/091 | 分类号： | C12N11/091;C12N9/88;C12P13/04 |
| 代理公司： | 杭州天勤知识产权代理有限公司 33224 | 代理人： | 沈金龙 |
| 地址： | 315048 浙江省宁波市宁波高新区菁华*** | 国省代码： | 浙江;33 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 固定 苏氨酸 醛缩酶 制备 方法 应用 | ||
1.一种固定化苏氨酸醛缩酶的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)获取苏氨酸醛缩酶酶液；
(2)将氨基树脂NAA进行活化；
(3)将活化后的氨基树脂NAA与苏氨酸醛缩酶酶液混合固定，获得固定化苏氨酸醛缩酶。
2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)中苏氨酸醛缩酶酶液由表达苏氨酸醛缩酶的工程菌菌体破碎后所得。
3.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)中氨基树脂NAA活化采用戊二醛作为交联剂进行活化。
4.如权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)中活化时，将氨基树脂NAA与体积分数为0.4％的戊二醛交联剂以质量∶体积＝1∶3的比例混合。
5.如权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)中氨基树脂NAA活化时在25℃下150rpm摇床摇晃下活化2～3h。
6.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(3)中固定时，活化后的氨基树脂NAA与苏氨酸醛缩酶酶液的混合比例为：每0.6g活化后的氨基树脂NAA与3mL苏氨酸醛缩酶酶液混合。
7.如权利要求6所述的制备方法，其特征在于，活化好的氨基树脂NAA与游离的苏氨酸醛缩酶酶液按每0.6g活化后的氨基树脂NAA与3mL苏氨酸醛缩酶酶液混合后，加入到10mL50mM，pH 8.0的磷酸缓冲液中在30℃、150rmp的摇床中固定化4～5h。
8.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，固定化苏氨酸醛缩酶在经过使用后失活，借助失活的固定化苏氨酸醛缩酶表面的氨基与戊二醛再次结合，然后与新鲜的苏氨酸醛缩酶酶液混合，获得新的固定化苏氨酸醛缩酶。
9.如权利要求1～8任一所述制备方法制备的固定化苏氨酸醛缩酶。
10.如权利要求9所述固定化苏氨酸醛缩酶在合成L-syn-对甲砜基苯丝氨酸中的应用。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于宁波泓森生物科技有限公司，未经宁波泓森生物科技有限公司许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/202110246526.8/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
