[发明专利]猪链球菌病-副猪嗜血杆菌病-猪传染性胸膜肺炎三联亚单位疫苗及其制备方法

说明书

本发明公开了一种猪链球菌病‑副猪嗜血杆菌病‑猪传染性胸膜肺炎三联亚单位疫苗及其制备方法。本发明三联亚单位疫苗含有猪链球菌抗原蛋白MRP、SLY和EF，副猪嗜血杆菌抗原蛋白AfuA、OppA2、CdtB、OppA，以及胸膜肺炎放线杆菌抗原蛋白ApxI、ApxII和OMP。实验证明，该疫苗能激发小鼠的强烈的免疫反应，对不同血清型的猪链球菌、副猪嗜血杆菌和胸膜肺炎放线杆菌攻毒小鼠均具有良好的交叉保护效果，充分说明本发明中制备的三联亚单位疫苗具有良好的保护效果。因此，本发明的提出为研制高效、广谱、廉价的猪链球菌病‑副猪嗜血杆菌病‑猪传染性胸膜肺炎疫苗奠定了坚实的基础，为猪链球菌病、副猪嗜血杆菌病以及猪传染性胸膜肺炎的防治提供了有效的技术手段。

技术领域

本发明涉及一种三联亚单位疫苗及其制备方法，特别涉及一种猪链球菌病-副猪嗜血杆菌病-猪传染性胸膜肺炎三联亚单位疫苗及其制备方法，本发明属于兽药技术领域。

背景技术

猪链球菌病是由猪链球菌(Streptococcus suis，SS)引起的以猪的脑膜炎、败血症、关节炎等临床症状为特征的细菌性传染病，是长期以来困扰全球养猪业的一个主要问题。猪链球菌血清型众多，其中的猪链球菌血清2型(SS2)还是一种人畜共患病病原。人通过特定的传播途径(例如伤口暴露等)可感染该病原 (张安定,金梅林,陈焕春,猪链球菌2型研究进展(综述).养殖与饲料,2005,13-18.)，若治疗不及时，则会引发败血症、脑膜炎等造成不良预后，严重威胁公共卫生安全。

猪链球菌毒力因子主要包括MRP、SLY、EF等。这几种毒力因子主要在病猪体内分离的菌株中发现，在健康猪体内分离的菌株很少含这几种毒力因子。 Wisselink等人提取猪链球菌2型的MRP和EF加佐剂乳化后免疫仔猪，发现其对猪链球菌2型致病株有较好的免疫保护力(Wisselink HJ,N Stockhofe-Zurwieden,LAT Hilgers,et al.,Assessment ofprotective efficacy of live and killed vaccines based on a non-encapsulatedmutant of Streptococcus suis serotype 2.Veterinary Microbiology,2002b:84,155-168)，这说明MRP和EF具有发展为亚单位疫苗的潜力。溶血素(suilysin)分泌于上清中，是硫醇激活的穿孔毒素家族成员。有实验证明猪链球菌产生溶血素的量与菌株的致病力有一定关系(Norton PM,C Rolph,PN Ward,et al.,Epithelial invasion and cell lysis byvirulent strains of Streptococcus suis is enhanced by the presence ofsuilysin.Pathogens Disease,2010:26,25-35.)。但是已经有研究证实其在链球菌致病过程中不是必须的。SLY具有溶血活性且对人的O型红细胞的溶血活性最强。