[发明专利]RNA聚合酶突变体及其应用、重组载体及其制备方法和应用、重组工程菌及其应用有效
| 申请号： | 202110247557.5 | 申请日： | 2021-03-06 |
| 公开（公告）号： | CN112980811B | 公开（公告）日： | 2022-02-25 |
| 发明（设计）人： | 马富强;白雪;杨晟;郭天杰;王志耘;杨广宇 | 申请（专利权）人： | 苏州瀚源新酶生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N9/12 | 分类号： | C12N9/12;C12N15/70;C12N1/21;C12P19/34;C12R1/19 |
| 代理公司： | 深圳市科进知识产权代理事务所(普通合伙) 44316 | 代理人： | 曹卫良 |
| 地址： | 215010 江苏省苏州*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | rna 聚合 突变体 及其 应用 重组 载体 制备 方法 工程 | ||
1.一种RNA聚合酶突变体，其特征在于，所述RNA聚合酶突变体为：由如SEQ ID No.2所示的氨基酸序列发生L447F突变得到的多肽；
或者，所述RNA聚合酶突变体为：由如SEQ ID No.2所示的氨基酸序列发生V586P突变得到的多肽；
或者，所述RNA聚合酶突变体为：由如SEQ ID No.2所示的氨基酸序列发生M833F突变得到的多肽；
或者，所述RNA聚合酶突变体为：由如SEQ ID No.2所示的氨基酸序列发生Q506A突变得到的多肽；
或者，所述RNA聚合酶突变体为：由如SEQ ID No.2所示的氨基酸序列发生L447F突变和V586P突变得到的多肽；
或者，所述RNA聚合酶突变体为：由如SEQ ID No.2所示的氨基酸序列发生L447F突变和M833F突变得到的多肽；
或者，所述RNA聚合酶突变体为：由如SEQ ID No.2所示的氨基酸序列发生L447F突变和Q506A突变得到的多肽；
或者，所述RNA聚合酶突变体为：由如SEQ ID No.2所示的氨基酸序列发生L447F突变和C531S突变得到的多肽；
或者，所述RNA聚合酶突变体为：由如SEQ ID No.2所示的氨基酸序列发生L447F突变、V586P突变和M833F突变得到的多肽；
或者，所述RNA聚合酶突变体为：由如SEQ ID No.2所示的氨基酸序列发生L447F突变、V586P突变和Q506A突变得到的多肽；
或者，所述RNA聚合酶突变体为：由如SEQ ID No.2所示的氨基酸序列发生L447F突变、V586P突变和C531S突变得到的多肽；
或者，所述RNA聚合酶突变体为：由如SEQ ID No.2所示的氨基酸序列发生L447F突变、V586P突变、C531S突变和M833F突变得到的多肽。
2.根据权利要求1所述的RNA聚合酶突变体，其特征在于，所述RNA聚合酶突变体的编码序列为：由如SEQ ID No.1所示的核苷酸序列组成的多核苷酸序列进行替代得到的多核苷酸，所述RNA聚合酶突变体的突变位点对应相应的核苷酸序列。
3.根据权利要求1~2任一项所述的RNA聚合酶突变体，其特征在于，所述RNA聚合酶突变体为可溶性酶或者固定化酶。
4.一种重组载体，其特征在于，含有权利要求1~2任一项所述的RNA聚合酶突变体的编码序列。
5.权利要求4所述的重组载体的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：采用突变扩增引物对对第一载体进行PCR扩增，得到重组载体，其中，所述突变扩增引物对含有所述RNA聚合酶突变体的突变位点对应的核苷酸序列，所述第一载体含有如SEQ ID No.2所示的氨基酸序列对应的编码序列。
6.一种重组工程菌，其特征在于，含有权利要求4所述的重组载体。
7.权利要求1~2任一项所述的RNA聚合酶突变体、权利要求4所述的重组载体或者权利要求6所述的重组工程菌在合成RNA中的应用。
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