[发明专利]一种保护血浆游离DNA的采血管在审
申请号: | 202110249829.5 | 申请日: | 2021-03-08 |
公开(公告)号: | CN113088434A | 公开(公告)日: | 2021-07-09 |
发明(设计)人: | 张若冰;郭诚;陈政;王云飞 | 申请(专利权)人: | 山东骥图生物科技有限公司 |
主分类号: | C12M1/24 | 分类号: | C12M1/24;C12Q1/6806;A61B5/15;B01L3/14 |
代理公司: | 湖南楚墨知识产权代理有限公司 43268 | 代理人: | 麦振声 |
地址: | 264035 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 保护 血浆 游离 dna 血管 | ||
本发明涉及DNA应用相关技术领域,尤其为一种保护血浆游离DNA的采血管,包括采血试管,所述采血试管的端部设置有塞子,所述采血试管的上侧外壁设置有盖子,所述采血试管的左侧外壁设置有标签,所述采血试管的内部侧壁设置有保护液,所述保护液组分包括防腐剂50‑400g/L、核酸酶抑制剂50‑400g/L,代谢抑制剂10‑100g/L,蛋白酶抑制剂0‑2g/L,采血后保护液发挥作用,保持血液环境稳定,防止血细胞破裂和游离DNA降解,可以实现37℃以下静置7天或正常运输2天内保持血液环境稳定的目标,基本可以满足当下医疗采血到检验过程的需要。
技术领域
本发明涉及DNA应用相关技术领域,具体为一种保护血浆游离 DNA的采血管。
背景技术
血浆游离DNA发现于1947年,是存在于人体血液中的胞外DNA,片段大小在约167bp。
近年来随着有效分离游离DNA技术、PCR检测技术的发展成熟,随之而来对游离DNA的研究越发深入,临床上进行游离DNA测序分析病症的应用日益扩展,其中具有代表性的如蓬勃发展的无创产前诊断和肿瘤液体活检产业等。但是游离的DNA在常规的采血管中很容易发生降解,采血管长时间放置则血液中血细胞会发生破裂释放出大量基因组DNA,污染游离DNA,造成测序数据失真。因此,一种长时间持续保持血浆游离DNA稳定的采血管是非常重要的。
在临床过程中,由于条件限制,经常无法在得到血液后第一时间分离血浆,长时间的无保护或保护不力情况下,血液中的细胞会发生破裂进而导致血细胞中的基因组DNA污染cfDNA,同时血液中游离DNA 会发生降解,进而造成无法提取足量游离DNA进行后续实验或实验结果失真,从而无法为临床提供有价值的信息。
针对保持血液环境稳定、保护cfDNA的需求,本发明提供一种保护血浆游离DNA的采血管,能够有效的稳定血液环境,既能长时间保护血细胞不破裂,又能有效保护血液中cfDNA不发生降解,可以确保血液环境满足游离DNA的提取需求,进而为得到准确的临床数据打好基础。
发明内容
本发明的目的在于提供一种保护血浆游离DNA的采血管,以解决上述背景技术中提出的问题。
为实现上述目的,本发明提供如下技术方案:
一种保护血浆游离DNA的采血管,包括采血试管,所述采血试管的端部设置有塞子,所述采血试管的上侧外壁设置有盖子,所述采血试管的左侧外壁设置有标签,所述采血试管的内部侧壁设置有保护液,所述保护液组分包括防腐剂50-400g/L、核酸酶抑制剂 50-400g/L,代谢抑制剂10-100g/L,蛋白酶抑制剂0-2g/L。
包括以下采血提取步骤:
S1,采血试管使用时需外连采血针,依靠采血试管内负压将血液引入采血管中,采血后保护液发挥作用,保持血液环境稳定,防止血细胞破裂和游离DNA降解;
S2,提取血浆游离DNA时,需在4℃环境下进行两轮离心去除血液中的血细胞及杂质得到血浆,第一轮离心要求以1900g转速持续离心十分钟,然后转移其上清至塑料离心管中,目的是除去血液中的血细胞;
S3,第二轮离心要求以16000g转速持续离心十分钟,然后转移其上清至后续实验使用的容器中,目的是去除血浆中残留的细胞碎片和其他杂质,第二轮离心后的上清液即为目标血浆,即可用于游离DNA提取。
优选的,所述采血试管采用医用塑料材质制作。
优选的,所述防腐剂为1,3-二羟甲基-5,5-二甲基海因、咪唑、 DTT、NaF、DU、恶唑烷、IDU中的一种或几种物质的组合,优选:1, 3-二羟甲基-5,5-二甲基海因、IDU,或包含它们的组合。
优选的,所述核酸酶抑制剂为ATA、EDTA盐、DTT、甲酰胺、柠檬酸盐、草酸盐中的一种或几种物质的组合,优选:EDTA盐、柠檬酸盐,或包含它们的组合。
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