[发明专利]虾血细胞虹彩病毒LAMP检测引物组、试剂盒及方法

权利要求书

1.一种虾血细胞虹彩病毒LAMP检测引物组，其特征在于：所述引物组包括OF、OR、IF、IR、LF、LR，其中：

OF：5’-AATGTTGGGAAAGTTTGCA-3’；

OR：5’-CCTTTCCTCGTTGGAACAA-3’；

IF：5’-CATCTAACACCATCTCCCGCCTCTGATTACGGGTAAAAAGGC-3’；

IR：5’-AGTCATGGATGAACCAAATGCTGACGAGCCCAATACGAATCG-3’；

LF：5’-CCAATTCGGGACTTGCAG-3’；

LR：5’-GAACGTTAAAGGGTCTCACG-3’。

2.一种如权利要求1所述的LAMP引物组在制备用于虾血细胞虹彩病毒RT-LAMP检测试剂盒中的应用。

3.一种虾血细胞虹彩病毒RT-LAMP检测试剂盒，其特征在于：所述RT-LAMP检测试剂盒包括权利要求1所述的LAMP检测引物组。

4.根据权利要求3所述的RT-LAMP检测试剂盒，其特征在于：所述RT-LAMP检测试剂盒还包括LAMP反应液。

5.根据权利要求4所述的RT-LAMP检测试剂盒，其特征在于：所述LAMP反应液包括5×恒温扩增缓冲液、dNTP、DNA聚合酶以及逆转录酶；所述DNA聚合酶为Bst DNA聚合酶；所述逆转录酶为HISCRIPT III逆转录酶；所述显色试剂包括SYBRTM Green I荧光染料。

6.根据权利要求5所述的RT-LAMP检测试剂盒，其特征在于，所述LAMP检测引物组、LAMP反应液和显色试剂所构建的环介导等温扩增反应体系含有：10mM OF引物1μL、10mM OR引物1μL、10mM IF引物4μL、10mM IR引物4μL、10mM LF引物2μL、10mM LR引物2μL、5×恒温扩增缓冲液5μL，10mM dNTP 3.5μL、0.25μL SYBRTM GREEN I(100×with DMSO)荧光染料、8U/μLBst DNA聚合酶1μL、5U/μL HISCRIPT III逆转录酶0.2μL，模板3μL、加超纯水至25μL。

7.根据权利要求3-6任意一项所述的RT-LAMP检测试剂盒，其特征在于：还包括核酸提取试剂。

8.根据权利要求3-6任意一项所述的RT-LAMP检测试剂盒，其特征在于：还包括阳性对照组和阴性对照组。

9.一种虾血细胞虹彩病毒RT-LAMP检测方法，其特征在于，所述RT-LAMP检测方法采用权利要求3-8任一项所述的RT-LAMP检测试剂盒，所述RT-LAMP检测方法包括以下步骤：待检样品核酸的提取、环介导等温扩增及荧光检测。

10.根据权利要求9所述的RT-LAMP检测方法，其特征在于，所述环介导等温扩增的条件为：61℃恒温扩增30分钟。