[发明专利]一种谷子单倍体诱导基因SiMTL及其应用

权利要求书

1.一种谷子单倍体诱导基因SiMTL，其特征在于，该基因的核苷酸序列为SEQ ID NO.1，其CDS序列为SEQ ID NO.2，其编码的蛋白的氨基酸序列为SEQ ID NO.3。

2.一种谷子母本单倍体诱导系的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：沉默或抑制谷子父本基因组中SiMTL基因的表达和/或活性或敲除SiMTL基因，并将用于沉默或抑制谷子父本基因组中SiMTL基因的表达和/或活性或敲除SiMTL基因的物质导入备选谷子中，得到转基因谷子，即为谷子母本单倍体诱导系；其中，所述SiMTL基因为权利要求1中所述的谷子单倍体诱导基因SiMTL。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述沉默或抑制谷子父本基因组中SiMTL基因的表达和/或活性或敲除SiMTL基因是以突变为目的使谷子父本基因组中SiMTL基因表达量降低或使SiMTL基因发生缺失突变或插入突变或碱基替换。

4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述使谷子父本基因组中SiMTL基因发生缺失突变或插入突变或碱基替换的方式为CRISPR/Cas9。

5.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述CRISPR/Cas9的靶序列为SEQ ID NO.1第1135-1154位和/或第1980-1999位。

6.一种谷子母本单倍体的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：将权利要求2-5任一项方法制备的谷子母本单倍体诱导系或其后代进行自交或者作为父本与其他谷子材料杂交，得到自交后代或杂交后代，即为所述谷子母本单倍体制备方法。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，还包括如下步骤：将所述自交后代或所述杂交后代单株进行表型鉴定和/或叶片倍性鉴定，选取至少一种方法鉴定为单倍体的后代单株为谷子母本单倍体。

8.一种用于检测权利要求2-7任一项所述转基因谷子的突变类型的扩增引物，其特征在于，所述引物的序列为SEQ ID NO.4和SEQ ID NO.5所示。

9.权利要求8所述扩增引物在谷子simtl突变体鉴定中的应用。

10.权利要求1所述的谷子单倍体诱导基因SiMTL或权利要求2-7任一项所述方法在制备谷子母本单倍体诱导系或在调控谷子母本单倍体诱导系的诱导率或在提高谷子母本单倍体诱导系的诱导率或在培育谷子单倍体或在选育谷子单倍体育种中的应用。

11.用于制备谷子母本单倍体诱导系或用于制备谷子母本单倍体的sgRNA，其特征在于，所述sgRNA包括sgRNA1和/或sgRNA2，所述sgRNA1序列为SEQ ID NO.1第1135-1154位，所述sgRNA2为SEQ ID NO.1第1980-1999位。