[发明专利]电磁辐射动物脑损伤模型构建方法

说明书

本发明公开了电磁辐射动物脑损伤模型构建方法，包括：设定电磁辐射条件，对试验动物进行电磁辐射处理；比较电磁辐射处理前后试验动物的海马CA2区神经元钙活动，若钙活动变化量具有统计学意义，则利用所述电磁辐射条件构建电磁辐射动物脑损伤模型。本发明能够较好地构建电磁辐射动物脑损伤模型，为阐明电磁辐射脑损伤效应的分子机理及其防治药物研发增加了可能性。

技术领域

本发明涉及医药技术领域。更具体地说，本发明涉及一种电磁辐射动物脑损伤模型及其构建方法。

背景技术

脑是电磁辐射损伤的重要敏感靶器官。流行病学调查显示，长期低剂量电磁辐射引起受辐射人员脑电图异常、脑功能紊乱，重者可出现行为异常、神经衰弱、失眠多梦、记忆力减退等。另有报道指出，电磁辐射可能增加老年痴呆的发病风险。动物实验研究表明，电磁辐射导致动物空间参考记忆、短时记忆、长时记忆及运动性学习记忆能力下降，且伴有焦虑、兴奋等行为异常。以上提示，电磁辐射可引起学习记忆和情绪行为异常。进一步研究发现，电磁辐射可引起海马脑区组织病理学改变。研究证实，海马是参与学习记忆功能的关键脑区，它不仅是长时程陈述性记忆形成的决定性结构，还参与短时记忆和空间记忆的形成，同时也参与情感行为的调节。这进一步提示，电磁辐射可导致海马脑区认知功能障碍。但是，目前还没有较好地构建及评价电磁辐射动物脑损伤模型的方法，为研发防治药物造成了障碍。

发明内容

本发明的一个目的是提供一种电磁辐射动物脑损伤模型及其构建方法，能够较好地构建电磁辐射动物脑损伤模型，为阐明电磁辐射脑损伤效应的分子机理及其防治药物研发增加了可能性。

为了实现根据本发明的这些目的和其它优点，根据本发明的一个方面，本发明提供了电磁辐射动物脑损伤模型构建方法，包括：设定电磁辐射条件，对试验动物进行电磁辐射处理；比较电磁辐射处理前后试验动物的海马CA2区神经元钙活动，若钙活动变化量具有统计学意义，则利用所述电磁辐射条件构建电磁辐射动物脑损伤模型。

进一步地，在对试验动物进行探究行为测试和情绪行为测试时，检测试验动物的海马CA2区神经元钙活动。

进一步地，预先向试验动物海马CA2区注射含基因编码钙离子指示剂GCaMP的腺相关病毒，然后利用光纤记录系统检测试验动物的海马CA2区神经元钙活动。

进一步地，在向试验动物脑内注射含基因编码钙离子指示剂GCaMP的腺相关病毒后，取试验动物脑组织冰冻切片，采用激光扫描共聚焦显微镜观察GCaMP绿色荧光蛋白表达，根据绿色荧光蛋白表达情况判断注射位置是否准确。

进一步地，利用旷场箱和新物体对试验动物进行探究行为测试，记录试验动物探索新物体的次数和时间，比较电磁辐射处理前后试验动物探索新物体的次数和时间，若次数变化量和时间变化量具有统计学意义，则利用所述电磁辐射条件构建电磁辐射动物脑损伤模型。

进一步地，利用高架十字迷宫对试验动物进行情绪行为测试，记录试验动物的开放臂活动路程和开放臂活动时间，比较电磁辐射处理前后试验动物的开放臂活动路程和开放臂活动时间，若开放臂活动路程变化量和开放臂活动时间变化量具有统计学意义，则利用所述电磁辐射条件构建电磁辐射动物脑损伤模型。

进一步地，还包括：比较电磁辐射处理前后试验动物的海马组织形态结构，若形态结构改变，则利用所述电磁辐射条件构建电磁辐射动物脑损伤模型。

进一步地，取试验动物脑组织切片，用光学显微镜和透射电子显微镜观察海马组织形态结构。

进一步地，所述电磁辐射条件至少包括中心频率参数、功率密度参数、重复频率、脉冲宽度、SAR值、辐射时间。

根据本发明的另一方面，本发明还提供了电磁辐射动物脑损伤模型，由所述的电磁辐射动物脑损伤模型构建方法构建得到。

本发明至少包括以下有益效果：