[发明专利]一种泥蚶血红蛋白α螺旋抗菌肽及其应用

说明书

本发明涉及一种抗菌肽，尤其涉及一种泥蚶血红蛋白α螺旋抗菌肽及其应用。该抗菌肽包括选自SEQ ID NO：1的氨基酸序列或由其组成，具有有效地抑菌作用，并通过低强度超声加工增效其对细菌的抑菌活性。低强度超声辅助处理的TGH2对细菌具有强烈的抑制作用，同时抗菌肽TGH2的α螺旋结构保持稳定。本发明为低强度超声的杀菌方法和TGH2作为食品防腐剂提供了实验依据。

技术领域

本发明涉及一种抗菌肽，尤其涉及一种泥蚶血红蛋白α螺旋抗菌肽及其应用。

背景技术

致病微生物引起的食源性疾病是消费者、行业和监管机构面临的主要问题。食源性致病菌在食品原料、加工和贮存过程中对人体健康构成威胁。

超声波是一种频率超过20kHz的声波，作为一种具有良好方向性、穿透性和反射率的振动能量形式，成为食品工业的前沿抗菌技术。一般认为超声抑菌机制分为声空化、声穿孔和声化学三种机制，声空化和声化学机制在中高强度超声下才能实现。据报道中高强度超声波可以抑制杏仁奶中的大肠杆菌O157:H7和单核细胞增生李斯特菌，并延长冷藏条件下的保质期，同样，对莴苣上这两种细菌的具有相同的抗菌活性。而低强度超声条件下不能灭活病原微生物。

抗菌肽(AMPs)主要是由不同物种产生的阳离子、两亲性肽，用于抵抗入侵的病原微生物，具有高效、低毒、无耐药性等特点。与传统的抗生素不同，大多数抗菌肽通过破坏细菌细胞膜发挥作用，但其α螺旋结构在中高强度超声条件下不稳定，易被破坏而失去抑菌作用。

发明内容

本发明要解决的技术问题，在于提供一种泥蚶血红蛋白α螺旋抗菌肽及其应用，在一定超声条件下，该抗菌肽的抑菌效果得到了很大的提高。

本发明是这样实现的：

本发明首先提供了一种泥蚶血红蛋白α螺旋抗菌肽，包括选自SEQ ID NO：1的氨基酸序列或由其组成。

本发明的抗菌肽可以采用本领域技术人员已知的方法合成，例如固相合成，并采用本领域技术人员已知的方法进行纯化，例如高效液相色谱法。

还提供了所述泥蚶血红蛋白α螺旋抗菌肽的编码基因，以及含有所述编码基因的表达盒、重组菌、重组载体和转基因细胞系。

进一步地，一种抑菌剂，其包括至少一种下列各项：所述的泥蚶血红蛋白α螺旋抗菌肽；或所述的编码基因。

进一步地，一种食品防腐剂，其包括至少一种下列各项：所述的泥蚶血红蛋白α螺旋抗菌肽；或所述的编码基因。

本发明最后提供了所述泥蚶血红蛋白α螺旋抗菌肽与超声协同增效抑菌的方法，经过反复多次实验，在超声频率为40MHz，功率为0.5W/cm²，超声时间1h的条件下，抗菌肽TGH2的对大肠杆菌的抑菌效果最好。

超声结合α螺旋抗菌肽可以从至少如下两方面对细菌造成破坏：一方面，大大增加大肠杆菌细胞膜的通透性，导致细菌死亡；另一方面，抗菌肽TGH2的α螺旋结构未被破坏，使得抗菌肽进入细菌细胞后具有抑菌活性。

本发明具有如下优点：本发明以α螺旋抗菌肽TGH2为研究对象，通过低强度超声加工增效其对细菌的抑菌活性；测定细菌细胞膜通透性的变化，并利用透射电镜观察超声结合抗菌肽TGH2对其破坏程度；最后对它的α螺旋结构稳定性进行评估。实验结果表明，低强度超声辅助处理的TGH2对细菌具有强烈的抑制作用。它的抑菌机理是首先增加细菌细胞膜的通透性，然后抗菌肽快速透过细胞膜进入细菌体内，破坏细菌内部结构，同时细菌内大量内溶物流出，导致细菌死亡，同时抗菌肽TGH2的α螺旋结构保持稳定。本发明为低强度超声的杀菌方法和TGH2作为食品防腐剂提供了实验依据。

附图说明

下面参照附图结合实施例对本发明作进一步的说明。