[发明专利]一种基因治疗脂肪肝的生物药剂及其制备方法

权利要求书

1.一种基因治疗脂肪肝的生物药剂，其特征在于：包括AAV2、TBG、APOA4，所述AAV2、TBG、APOA4在体外通过基因重组形成能用于静脉注射的基因载体生物药剂。

2.根据权利要求1所述基因治疗脂肪肝的生物药剂，其特征在于:所述APOA4是46kDa的载脂蛋白A4。

3.根据权利要求1所述基因治疗脂肪肝的生物药剂，其特征在于:所述AAV2是腺相关病毒2型。

4.根据权利要求1所述基因治疗脂肪肝的生物药剂，其特征在于:所述TBG是肝脏特异性表达的启动子。

5.根据权利要求1所述基因治疗脂肪肝的生物药剂，其特征在于:所述AAV2的病毒载体是PFD-rAAV-TBG-GFP空质粒。

6.一种基因治疗脂肪肝的生物药剂制备方法，其特征在于:步骤如下，

S1，获取治疗性基因，从正常生物体组织cDNA库扩增APOA4全长cDNA片段，并在该片段两侧增加SpeI和Sa1I酶切位点；

S2，在AAV2病毒载体PFD-rAAV-TBG-GFP空质粒上通过SpeI和Sa1I酶切位点将APOA4cDNA克隆入该质粒制成PFD-rAAV-TBG-APOA4-GFP治疗性质粒；

S3，将PFD-rAAV-TBG-APOA4-GFP质粒通过转染、扩增、纯化制成PFD-rAAV-TBG-mAPOA4-GFP基因载体生物药剂。

7.根据权利要求6所述基因治疗脂肪肝的生物药剂制备方法，其特征在于:还包括步骤S4，将PFD-rAAV-TBG-mAPOA4-GFP基因载体生物药剂通过生理盐水稀释形成能够静脉注射的生物药剂。

8.根据权利要求7所述基因治疗脂肪肝的生物药剂制备方法，其特征在于:所述生物药剂稀释到的浓度为2×10¹⁰vg/ml。