[发明专利]一种基于FPR1通道功能的化学品致癌性体外检测方法

权利要求书

1.一种基于FPR1通道功能的化学品致癌性体外检测方法，其特征在于：包括如下步骤：

（1）细胞接种培养：将FPR1-CHO细胞培养至细胞融合度达70%以上，获得待检细胞；

（2）染料孵育：向所述待检细胞加入染料进行孵育，得到染色细胞；

（3）受试液处理细胞：将所述染色细胞暴露于含有化学品的受试液中，其中，所述化学品包括重金属物质、生物毒素物质中的一种或几种；

（4）进行高通量实时荧光检测，若细胞的FPR1通道被激活，则可确定所述化学品具有致癌性。

2.如权利要求1所述的基于FPR1通道功能的化学品致癌性体外检测方法，其特征在于：步骤（3）中，所述重金属物质包括镉、铬、铅中的一种或几种。

3.如权利要求1所述的基于FPR1通道功能的化学品致癌性体外检测方法，其特征在于：步骤（3）中，所述生物毒素物质包括赭曲霉素A、展青霉素、伏马菌素中的一种或几种。

4.如权利要求1-3任一项所述的基于FPR1通道功能的化学品致癌性体外检测方法，其特征在于：步骤（3）中，所述受试液的溶剂包括HBSS、DMSO、PBS的一种或几种。

5.如权利要求1-3任一项所述的基于FPR1通道功能的化学品致癌性体外检测方法，其特征在于：步骤（2）中，所述染料孵育其为用钙离子染料Fluo-4 AM染色，在37摄氏度下孵育45 ~ 60 min。

6.如权利要求1-3任一项所述的基于FPR1通道功能的化学品致癌性体外检测方法，其特征在于：步骤（4）中，所述高通量实时荧光检测的参数如下，

激发波长范围为470 ~ 495 nm，测定波长范围为515 ~ 575 nm，检测时间大于60 s。

7.如权利要求6所述的基于FPR1通道功能的化学品致癌性体外检测方法，其特征在于：所述检测时间为200s-1000 s，其中在第60s时加入含有化学品的受试液。