[发明专利]三种泥鳅的肌肉营养成分与消化酶活力的分析研究

权利要求书

1.一种三种泥鳅的肌肉营养成分与消化酶活力的分析研究，其特征在于：包括以下步骤：

a、试验材料的选择

随机挑选体质健壮、体表无伤的泥鳅（MA）、大鳞副泥鳅（PD）和台湾大泥鳅（TW）各30尾，准备解剖；

b、样品的处理

鱼体解剖前采用MS-222将其麻醉，麻醉后取鱼体背部两侧肌肉，用滤纸擦干，捣碎混匀后制成样品，将样品平均分成两份，其中一份用于常规营养成分的测定，另一份置于冰箱-20℃冷冻保存，冷冻干燥后用于氨基酸和脂肪酸的测定；

c、肌肉营养品质的评价

肌肉营养价值的评定根据1973年FAO/WHO建议的氨基酸评分标准模式(%,dry)和全鸡蛋蛋白质的氨基酸模式(%,dry）分别按以下公式计算氨基酸评分(AAS)、化学评分(CS)和必需氨基酸指数(EAAI)：

式中：aa为试验样品氨基酸含量(%)；AA(FAO/WHO)为FAO/WHO评分标准模式中同种氨基酸含量(%)；AA(Egg)为全鸡蛋蛋白质中同种氨基酸含量(%)；n为比较的必需氨基酸个数；A，B，C，…，H为样品肌肉蛋白质的必需氨基酸含量(%,dry)；AE，BE，CE，…，HE为全鸡蛋蛋白质的必需氨基酸含量(%,dry)；

d、组织消化酶的测定

在样品处理过程中，每种泥鳅鳅各取6尾，采用MS-222麻醉后置于冰盘上，解剖取出肠道与肝胰脏，清除肠道内食物及粪便，剔除肠壁脂肪，去离子水冲洗后保存于-20℃冰箱冷冻备用；采用试剂盒测定肠道与肝胰脏中的蛋白酶、脂肪酶与淀粉酶活力；

e、测定的试验数据用SPSS17.0软件进行生物学统计，描述性统计值使用平均值±标准误( mean±SD)表示。

2.根据权利要求1所述的三种泥鳅的肌肉营养成分与消化酶活力的分析研究，其特征在于：所述试验材料取自临沂市水产养殖场，三种泥鳅的规格分别为泥鳅体质量为(18.94±0.73)g，体长为(13.57±0.59)cm；大鳞副泥鳅体质量为(17.35±0.39)g，体长为(13.02±0.40)cm；台湾大泥鳅体质量为(20.17±0.89)g，体长为(12.63±0.70)cm。

3.根据权利要求1所述的三种泥鳅的肌肉营养成分与消化酶活力的分析研究，其特征在于：所述常规营养成分的测定包括水分、灰分、粗蛋白和粗脂肪的测定，水分测定参照GB5009.3-2010，采用105℃烘干失水法，用BGZ-246电热恒温鼓风干燥箱测定；灰分测定参照GB/T5009.4-2010，采用550℃干法灰化法，用Thermo BF51794JC-1马弗炉测定；粗蛋白测定参照GB/T5009.5-2010，采用微量凯氏定氮法，用FOSS 8400全自动定氮仪测定；粗脂肪测定参照GB/T5009.6-2008，用BUCHI E-812全自动索氏脂肪提取仪测定。

4.根据权利要求1所述的三种泥鳅的肌肉营养成分与消化酶活力的分析研究，其特征在于：所述测定肌肉中的氨基酸首先采用盐酸水解法对样品进行前处理，之后使用日立L-8900氨基酸分析仪进行测定；测定脂肪酸含量首先将样品经皂化甲酯化，然后上Agilent7890A气相色谱仪进行分析。

5.根据权利要求1所述的三种泥鳅的肌肉营养成分与消化酶活力的分析研究，其特征在于：所述组织消化酶的测定中采用的试剂盒购自南京建成生物工程研究所，蛋白酶使用的试剂盒型号为A080-2-2，脂肪酶使用的试剂盒型号为A054-2-1，淀粉酶使用的试剂盒型号为C016-1-1。

6.根据权利要求1所述的三种泥鳅的肌肉营养成分与消化酶活力的分析研究，其特征在于：所述组织消化酶的测定中，胰蛋白酶活性定义为，在pH8.0，37℃条件下，每毫克蛋白中含有的胰蛋白酶每分钟使吸光度变化0.003即为一个酶活力单位；脂肪酶活性单位定义为，在37℃条件下，每毫克组织蛋白质在本反应体系中与底物反应1min，每消耗1μmol底物为1个酶活性单位；淀粉酶活性单位定义为，在37℃条件下，组织中每毫克蛋白与底物作用30min，水解10mg淀粉定义为1个酶活力单位。