[发明专利]降钙素原致敏胶乳、试剂盒及制备方法、应用

说明书

本发明公开了降钙素原致敏胶乳、试剂盒及制备方法、应用，降钙素原致敏胶乳的制备方法，包括以下步骤：S1、将两种不同粒径的氨基微球分别与N‑琥珀酰亚胺基‑3‑(2‑吡啶基二硫)丙酸酯进行交联反应，分别得到产物A和产物B；S2、将步骤S1得到的产物A和产物B分别加入二巯苏糖醇进行产物巯基化，分别得到产物C和产物D；S3、将产物A和产物D进行交联，或产物B和产物C进行交联获得微球结合物；S4、将步骤S3获得的微球结合物与交联剂按一定比例混合活化微球结合物，然后加入降钙素原抗体包被微球结合物，加入封闭液，获得降钙素原致敏胶乳。本发明既保证产品灵敏度和线性的同时，同时大大提高了产品的批间、批内精密度及稳定性性能。

技术领域

本发明涉及生化试剂测定技术领域，具体涉及降钙素原致敏胶乳、试剂盒及制备方法、 应用。

背景技术

降钙素原(PCT)是降钙素(CT)的前体物，由116个氨基酸组成的糖蛋白，分子量约为13KD，包括59个氨基酸的N端，32肽的活性降钙素(CT)以及21肽的下钙素；正常人 全血、血浆及血清中含量极低，小于0.5ng/ml；半衰期约20～24小时，稳定性较好；大量的 研究资料表明，PCT与感染所致的炎症反应综合征、脓毒症、脓毒性休克等全身感染情况的 严重程度和预后具有明确的相关性。当PCT浓度升至2～10ng/ml时，很可能为脓毒症、严重 脓毒症或脓毒性休克，具有高度器官功能障碍的风险；当PCT浓度超过10ng/ml时，高度提 示为严重细菌性脓毒症或脓毒性休克，并常伴有器官功能衰竭，具有高度死亡风险；当PCT 浓度不超过0.05ng/ml时，细菌感染的可能性非常小，几乎不会发生血流感染。

目前，采用降钙素原试剂盒用于检测降钙素原(PCT)的浓度。现有的降钙素原试剂盒 以胶乳增强免疫技术为基础的诊断试剂凭借其高灵敏度、线性范围广、稳定性好的性能，越 来越受到临床医学检验工作者的认可，主要包括降钙素原致敏胶乳。但是，现有的降钙素原 试剂盒存在批间及批内精密度差、样本局限、及稳定性差等缺点。

发明内容

本发明的目的在于提供降钙素原致敏胶乳及其制备方法、应用，采用本发明所述方法制 备的降钙素原致敏胶乳，既能保证产品灵敏度和线性，且大大提高了产品的批批间、批内精 密度及稳定性性能。

此外，本发明还包括采用上述降钙素原致敏胶乳制备的试剂盒。

本发明通过下述技术方案实现：

降钙素原致敏胶乳的制备方法，包括以下步骤：

S1、将两种不同粒径的氨基微球分别与N-琥珀酰亚胺基-3-(2-吡啶基二硫)丙酸酯进行交 联反应，分别得到产物A和产物B；

S2、将步骤S1得到的产物A和产物B分别加入二巯苏糖醇进行产物巯基化，分别得到 产物C和产物D；

S3、将产物A和产物D进行交联，或产物B和产物C进行交联获得微球结合物；

S4、将步骤S3获得的微球结合物与交联剂按一定比例混合活化微球结合物，然后加入降 钙素原抗体包被微球结合物，加入封闭液，获得降钙素原致敏胶乳。

本发明制备的产物A和产物中含有硫醇吡啶保护基，产物C和产物D中含有巯基硫醇吡 啶保护基，在步骤S3中，巯基与硫醇吡啶保护基交换，微球交联。

本发明运用硫醇吡啶保护基交换作用，将不同粒径大小的聚苯乙烯微球连接在一起，将 特异性抗体包被在融合微球可制备得到致敏胶乳。与现有的偶联技术相比，大大缩短了制备 时间，提高了生产效率。

本发明硫醇吡啶保护基交换作用，将不同粒径大小的聚苯乙烯微球连接在一起，将特异 性抗体包被在融合微球可制备得到致敏胶乳，既保证产品灵敏度和线性的同时，与现有的多 种致敏胶乳混合相比，大大提高了产品的批间、批内精密度及稳定性性能。