[发明专利]一种定量检测前列腺癌生物标志物miRNA-141的组件、系统及其应用

说明书

本申请提供一种定量检测前列腺癌生物标志物miRNA‑141的组件、系统以及应用。所述组件包含：PCs‑AuNPs纳米探针、经巯基化修饰的纸基底，可移动检测纸基和直流电源；其中，PCs‑AuNPs纳米探针可与前列腺癌标志物miRNA‑141反应，其经Au‑S键固定在经巯基化修饰的纸基底上；可移动检测纸基位于所述纸基底的下层，经移动可与经巯基化修饰的纸基底接触；直流电源为可移动检测纸基供电。本发明基于微量血样，即可达到高灵敏度、特异性和可重复性。

技术领域

本申请涉及生物检测技术领域，具体涉及一种定量检测前列腺癌生物标志物miRNA-141的组件、系统及其应用。

背景技术

公开该背景技术部分的信息仅仅旨在增加对本申请的总体背景的理解，而不必然被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技术。

miRNA是小的非蛋白质编码单链RNA片段，具有19-23个核苷酸，并且miRNA能够以蛋白质-RNA复合物的形式从细胞释放到血液循环中。miRNA参与了许多基本的细胞过程，包括细胞的发育、凋亡和代谢等，具有重要研究意义。此外，各种分子生物学实验证明了几种miRNA在癌症的发生和发展中的重要作用，使其成为癌症的重要分子。miRNA作为一种早期癌症诊断中重要的敏感指标及依据，对癌症标志物miRNA进行灵敏分析方法的开发不仅具有基础科学意义，而且可以大大有益于临床诊断解决方案在实际应用中。

迄今为止，有多种方法可证明miRNA检测可以满足对临床诊断分析不断增长的需求，例如荧光检测法、比色法、电化学发光法、基于表面等离振子共振的传感器、表面增强拉曼散射(SERS)等。通过这些方法虽然可以达到检测miRNA的目的，但是其过程十分复杂繁琐，且需要经过培训的专业人员进行检测。同时，由于miRNA的含量低且血液中的背景非常复杂，因此开发一种直接在人类血液样品中定量检测miRNA的方法仍然是一个挑战性问题。

发明内容

为了改善现有技术的不足，本发明提供了一种定量检测前列腺癌生物标志物miRNA-141的组件、系统及其应用和检测方法。本发明的多重信号放大纸喷雾质谱方案基于微量血样，即可达到高灵敏度、特异性和可重复性，为通过质谱实现对复杂体液的检测提供了良好的平台。

具体地，本发明提供了下述的技术特征，以下技术特征的一个或多个的结合构成本发明的技术方案。

在本发明的第一方面，本发明提供了一种定量检测前列腺癌生物标志物miRNA-141的组件，其包括：PCs-AuNPs纳米探针、经巯基化修饰的纸基底，可移动检测纸基和直流电源；其中，PCs-AuNPs纳米探针可与前列腺癌标志物miRNA-141反应，其经Au-S键固定在经巯基化修饰的纸基底上；可移动检测纸基位于所述纸基底的下层，经移动可与经巯基化修饰的纸基底接触；直流电源为可移动检测纸基供电。

在本发明的实施方式中，所述PCs-AuNPs纳米探针由金纳米颗粒与三元DNA双链体探针经Au-S键连接获得；其中，三元DNA双链体探针由DNA链SH-L与信号链PCs-sRNA反应形成。

其中，SH-L为经硫醇化的，序列在5’端修饰有SH(CH₂)₆-基团，具体序列信息如下所示：

SH(CH₂)₆-5’-TTTTTTTTTTTTTTTTTCCACCCCATCTTTACCAGACCACCCCATCTTTACCAGACAGTGTTA-3’(SEQ ID No.1)。

其中，PCs-sRNA信号链为经氨基基团修饰的，序列在5’和3’端修饰有NH₂(CH₂)₆-基团，具体序列信息如下所示：