[发明专利]一种利用多色荧光内标动态校正DNA荧光光谱的方法在审
申请号: | 202110274608.3 | 申请日: | 2021-03-15 |
公开(公告)号: | CN113358609A | 公开(公告)日: | 2021-09-07 |
发明(设计)人: | 张涛;贾二惠;郭甜利;荣海博;金川 | 申请(专利权)人: | 公安部第一研究所;北京中盾安民分析技术有限公司 |
主分类号: | G01N21/64 | 分类号: | G01N21/64 |
代理公司: | 北京汲智翼成知识产权代理事务所(普通合伙) 11381 | 代理人: | 陈曦;贾兴昌 |
地址: | 100044 北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 利用 多色 荧光 动态 校正 dna 光谱 方法 | ||
1.一种利用多色荧光内标动态校正DNA荧光光谱的方法,其特征在于包括如下步骤:
(1)确定待检测的STR基因座,并规划所述STR基因座中各个荧光颜色通道的排布;
(2)设计多色荧光内标;
(3)在每一次DNA片段检测分析时,识别前期嵌入的所述多色荧光内标,动态构建相应的光谱校正矩阵,进行DNA荧光光谱的校正。
2.如权利要求1所述利用多色荧光内标动态校正DNA荧光光谱的方法,其特征在于:
所述步骤(2)中,在预定间距的内标片段序列标记上不同颜色的荧光染料,得到所述多色荧光内标。
3.如权利要求2所述利用多色荧光内标动态校正DNA荧光光谱的方法,其特征在于:
所述预定间距为彼此相等的间距。
4.如权利要求2所述利用多色荧光内标动态校正DNA荧光光谱的方法,其特征在于:
所述多色荧光内标中,不同颜色标记的内标片段避免和待检测的STR基因座的bp段相近或重叠。
5.如权利要求4所述利用多色荧光内标动态校正DNA荧光光谱的方法,其特征在于:
不同颜色标记的内标片段与待检测的STR基因座的bp段相距在10bp以上。
6.如权利要求5所述利用多色荧光内标动态校正DNA荧光光谱的方法,其特征在于:
不同颜色标记的内标片段,彼此之间相距2bp以上。
7.如权利要求4所述利用多色荧光内标动态校正DNA荧光光谱的方法,其特征在于:
不同颜色标记的内标片段所对应的DNA片段在50~100bp之间。
8.如权利要求1所述利用多色荧光内标动态校正DNA荧光光谱的方法,其特征在于:
所述步骤(3)中,实时采集荧光光谱,直至检测到多个相等间距的原始荧光光谱峰,据此判断已采集到所述多色荧光内标;计算多色荧光染料的光谱分布,动态构建相应的光谱校正矩阵。
9.如权利要求8所述利用多色荧光内标动态校正DNA荧光光谱的方法,其特征在于:
利用所述光谱校正矩阵对之前的原始荧光光谱进行回溯解谱,并评估实际解谱质量。
10.如权利要求9所述利用多色荧光内标动态校正DNA荧光光谱的方法,其特征在于:
如果满足质量要求,继续用所述光谱校正矩阵实时处理后续的DNA片段的荧光光谱数据,以解析获得各个荧光颜色通道的待检DNA片段的谱峰,进而生成预定格式的数据文件,实现STR分型检测。
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