[发明专利]一种利用多色荧光内标动态校正DNA荧光光谱的方法在审

专利信息
申请号: 202110274608.3 申请日: 2021-03-15
公开(公告)号: CN113358609A 公开(公告)日: 2021-09-07
发明(设计)人: 张涛;贾二惠;郭甜利;荣海博;金川 申请(专利权)人: 公安部第一研究所;北京中盾安民分析技术有限公司
主分类号: G01N21/64 分类号: G01N21/64
代理公司: 北京汲智翼成知识产权代理事务所(普通合伙) 11381 代理人: 陈曦;贾兴昌
地址: 100044 北*** 国省代码: 北京;11
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摘要:
搜索关键词: 一种 利用 多色 荧光 动态 校正 dna 光谱 方法
【权利要求书】:

1.一种利用多色荧光内标动态校正DNA荧光光谱的方法,其特征在于包括如下步骤:

(1)确定待检测的STR基因座,并规划所述STR基因座中各个荧光颜色通道的排布;

(2)设计多色荧光内标;

(3)在每一次DNA片段检测分析时,识别前期嵌入的所述多色荧光内标,动态构建相应的光谱校正矩阵,进行DNA荧光光谱的校正。

2.如权利要求1所述利用多色荧光内标动态校正DNA荧光光谱的方法,其特征在于:

所述步骤(2)中,在预定间距的内标片段序列标记上不同颜色的荧光染料,得到所述多色荧光内标。

3.如权利要求2所述利用多色荧光内标动态校正DNA荧光光谱的方法,其特征在于:

所述预定间距为彼此相等的间距。

4.如权利要求2所述利用多色荧光内标动态校正DNA荧光光谱的方法,其特征在于:

所述多色荧光内标中,不同颜色标记的内标片段避免和待检测的STR基因座的bp段相近或重叠。

5.如权利要求4所述利用多色荧光内标动态校正DNA荧光光谱的方法,其特征在于:

不同颜色标记的内标片段与待检测的STR基因座的bp段相距在10bp以上。

6.如权利要求5所述利用多色荧光内标动态校正DNA荧光光谱的方法,其特征在于:

不同颜色标记的内标片段,彼此之间相距2bp以上。

7.如权利要求4所述利用多色荧光内标动态校正DNA荧光光谱的方法,其特征在于:

不同颜色标记的内标片段所对应的DNA片段在50~100bp之间。

8.如权利要求1所述利用多色荧光内标动态校正DNA荧光光谱的方法,其特征在于:

所述步骤(3)中,实时采集荧光光谱,直至检测到多个相等间距的原始荧光光谱峰,据此判断已采集到所述多色荧光内标;计算多色荧光染料的光谱分布,动态构建相应的光谱校正矩阵。

9.如权利要求8所述利用多色荧光内标动态校正DNA荧光光谱的方法,其特征在于:

利用所述光谱校正矩阵对之前的原始荧光光谱进行回溯解谱,并评估实际解谱质量。

10.如权利要求9所述利用多色荧光内标动态校正DNA荧光光谱的方法,其特征在于:

如果满足质量要求,继续用所述光谱校正矩阵实时处理后续的DNA片段的荧光光谱数据,以解析获得各个荧光颜色通道的待检DNA片段的谱峰,进而生成预定格式的数据文件,实现STR分型检测。

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