[发明专利]一种抗乳腺癌的乙型强心苷的制备及其抗肝癌应用

说明书

本发明公开了一种抗乳腺癌的乙型强心苷，其结构如下：上述化合物是从铁筷子Helleborus thibetanus中提取。铁筷子根茎部位干粉先用95％乙醇浸泡，然后减压浓缩得到浓缩液。用等体积的乙酸乙酯、正丁醇分别对上述的浓缩液进行萃取。将正丁醇萃取相先后经D101大孔树脂柱、正相硅胶柱、反相ODS、凝胶柱等柱色谱层析分离后，由半制备高效液相色谱纯化得到单体化合物。上述乙型强心苷对人乳腺癌细胞(MDA‑MB‑231)具有很好的抑制作用，因此可制成新型抗乳腺癌药物。本发明为新型抗乳腺癌药物提供了物质基础，为开发铁筷子的药用价值及其相关临床应用提供有效科学数据。

技术领域

本发明属于天然药物化学领域，涉及从铁筷子中分离提取的化合物及其制备方法与在制备抗乳腺癌药物的应用。

背景技术

乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一，据资料统计，发病率占全身各种恶性肿瘤的7-10％。乳腺癌的病因尚未完全清楚，乳腺癌的预防与治疗已成为全球研究热点之一。当前主要有外科手术治疗、放射治疗等治疗手段，但存在术后复发率高、癌细胞易转移、等问题；因此迫切寻找安全、高效低毒的新型抗乳腺癌药物。强心苷类化合物是目前治疗心力衰竭和心房颤动的常用药物。强心苷类化合物具有很好的抗肿瘤活性，可以诱导癌细胞凋亡和细胞自噬。该类化合物具有优先杀伤癌细胞、毒副作用小、不易产生耐药性等特征，是探索新型抗乳腺癌药物研究热点。

铁筷子植物是我国特有的一种植物，主要分布在四川西北部、甘肃南部和陕西南部，主治活血散瘀、尿道炎、膀胱炎、疮疖肿毒等症。近年来人们研究了铁筷子的化学成分，主要包括甾体皂苷、黄酮、植物蜕皮激素、脂肪酸和乙型强心苷，且具有较好的生物活性，包括抗乳腺癌活性。因此，从铁筷子中分离具有抗乳腺癌的化合物对于新型抗乳腺癌药物研发发挥着重要作用。

发明内容

本发明的目的是提供一种乙型强心苷化合物，具有抗乳腺癌作用。

本发明所要解决的另一目的在于提供上述的乙型强心苷的制备方法。

本发明所要解决的再一目的在于上述乙型强心苷在抗乳腺癌药物的应用。

本发明的具体技术方案。

一种乙型强心苷，其结构式如下：

命名为5β,14β,16β-trihydroxy-19-oxo-3β-[(a-L-rhamnopyranosyl)oxy]bufa-20,22-dienolide

上述乙型强心苷化合物的制备步骤：

(1)将采集的铁筷子植物根茎部位自然风干，粉碎后用95％乙醇浸泡，浸泡液减压浓缩得到浓缩液；

(2)浓缩液制成水浊液，然后用正丁醇萃取，有机相浓缩后得到正丁醇萃取物；

(3)将正丁醇萃取物采用D101大孔树脂柱层析，分别用水、30％、50％、95％的乙醇洗脱，最后分别蒸馏浓缩得到四个馏分；

(4)铁筷子正丁醇50％部分过MCI反相柱层析，用乙醇：水(35％、50％、60％、80％)梯度洗脱得到四个组分Fr.1-Fr.4；

(5)Fr.2首先用正相硅胶柱柱分离，用二氯甲烷：甲醇(20:1、10:1、8:1、5:1、2:1)梯度洗脱，得到六个组分Fr.2.1-Fr.2.6；

(6)将Fr.2.2析出大量结晶，将结晶滤出后，用甲醇反复清洗；

(7)清洗后的样品经半制备型高效液相色谱(65％甲醇水，3mL/min，14min)得到上述乙型强心苷纯品。

步骤(1)中，铁筷子粉粹至粒度直径小于3mm。

步骤(1)中，铁筷子与95％乙醇的体积比1:2-1:3。