[发明专利]一种用于根系分泌物原位可视化检测的荧光印迹膜及其制备与应用

权利要求书

1.一种用于根系分泌物原位可视化检测的荧光印迹膜的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）将硼氢化钠和碲粉混合均匀并分散于水中，常温下避光反应6～12 h，得到前驱体NaHTe溶液；将氯化镉和巯基乙酸溶于水中，调节pH至碱性，通氮除氧，加入前驱体NaHTe溶液，90～120℃加热反应3～9h，得到CdTe QDs溶液，洗涤，离心，冻干，得到量子点粉末；

（2）将连续相、表面活性剂和水混合均匀形成微乳液，加入CdTe量子点溶液并混匀，然后依次加入催化剂NH₃•H₂O和交联剂并混合均匀，持续搅拌进行包硅反应4～8 h，再加入氨丙基硅氧烷、苯基硅氧烷或十六烷基三甲氧基硅烷、植物根系分泌物溶液、交联剂并充分混匀，持续搅拌进行印迹反应16～24h，反应后加入丙酮超声破乳，纯化，干燥得到CdTe@SiO₂@MIPs分子印迹聚合物粉末；

（3）将琼脂和水溶性天然或合成高分子化合物溶解于水中，加入羧甲基纤维素钠并搅拌均匀，得到高分子化合物混合溶液，冷却至室温，加入CdTe@SiO₂@MIPs分子印迹聚合物粉末并混合均匀，自然晾干脱水成膜，即得负载CdTe@SiO₂@MIPs凝胶印迹膜；

步骤（2）所述纯化的方法为：将加入丙酮超声破乳后的溶液进行离心，取沉淀物，分别用环己烷、乙醇、蒸馏水离心洗涤沉淀物，所得产物用体积比为（1～2）：9的酸与醇或酸与乙腈组成的混合液洗脱掉植物根系分泌物，得到纯化产物；

步骤（3）所述琼脂、水溶性天然高分子或合成高分子化合物和羧甲基纤维素钠的摩尔比为1：（1～2）：2。

2.根据权利要求1所述一种用于根系分泌物原位可视化检测的荧光印迹膜的制备方法，其特征在于，步骤（2）所述连续相、表面活性剂、水和CdTe量子点溶液的体积比为100 ：（10～14）：1 ：4；所述CdTe量子点溶液的浓度为0.5～1.5‰；所述CdTe量子点溶液、催化剂NH₃•H₂O和第一次加入交联剂的体积比为4：1：（0.5～1.5）；所述CdTe量子点溶液、氨丙基硅氧烷、苯基硅氧烷或十六烷基三甲氧基硅烷、植物根系分泌物溶液和第二次加入交联剂的体积比为40：（1～2）：1：2：5；所述植物根系分泌物溶液的浓度为30～40wt%。

3.根据权利要求1所述一种用于根系分泌物原位可视化检测的荧光印迹膜的制备方法，其特征在于，步骤（3）所述高分子化合物混合溶液中高分子化合物的质量分数为2～10%；所述CdTe@SiO₂@MIPs分子印迹聚合物在高分子化合物混合液中的浓度为2～3 wt%。

4.根据权利要求1所述一种用于根系分泌物原位可视化检测的荧光印迹膜的制备方法，其特征在于，步骤（1）所述硼氢化钠和碲粉的质量比为1：(1～2)；所述硼氢化钠和碲粉混合均匀并分散于水中，所得溶液中硼氢化钠的浓度为1.6～3.0wt%；所述氯化镉和巯基乙酸溶于水中，巯基乙酸与水的体积比为（1～3）：100；所得水溶液中氯化镉的浓度为0.8～1wt%；所述巯基乙酸与前驱体NaHTe溶液的体积比为（1～1.5）：50。

5.根据权利要求1所述一种用于根系分泌物原位可视化检测的荧光印迹膜的制备方法，其特征在于，步骤（2）所述植物根系分泌物溶剂中的植物根系分泌物为绿原酸、苯甲酸、香草醛、阿魏酸和叶绿醇中的一种；所述连续相为环己烷、二甲基亚砜、石油醚和丙烯酸中的至少一种；所述表面活性剂为壬基酚聚氧乙烯醚、曲拉通X-100、吐温20和三乙醇胺中的至少一种；所述交联剂为正硅酸乙酯、正硅酸甲酯、正硅酸丙酯和三乙氧基硅烷中的至少一种；所述氨丙基硅氧烷为3-氨丙基三乙氧基硅烷、3-氨丙基三甲氧基硅烷、3-氨丙基三羟基硅烷和γ-氨乙基氨丙基三甲氧基硅烷中的至少一种；所述苯基硅氧烷为苯基三乙氧基硅烷、苯基三甲氧基硅烷和二苯基二甲氧基硅烷中的至少一种。