[发明专利]一种索马鲁肽的固相合成方法

说明书

本发明公开了一种索马鲁肽的固相合成方法，其包括：(1)将Gly与树脂偶联，得到Fmoc‑Gly‑树脂；(2)使用Fmoc‑Gly‑树脂，按照索马鲁肽序列从C端到N端的顺序依次偶联其余氨基酸，得到索马鲁肽主链‑树脂；(3)脱除索马鲁肽主链中Lys²⁶的侧链保护基，然后在Lys²⁶上偶联索马鲁肽的侧链，得到索马鲁肽‑树脂；和(4)将索马鲁肽‑树脂裂解，纯化即得索马鲁肽。本发明提供一种简便、高效的索马鲁肽制备方法，解决目前索马鲁肽制备工艺繁琐、效率低或成本高的问题。

技术领域

本发明属于多肽合成技术领域，具体涉及了一种索马鲁肽固相合成的方法。

背景技术

糖尿病是一组由多病因引起的以慢性高血糖为特征的终身性代谢性疾病。根据国际糖尿病联盟(IDF)最新版数据显示，全球成人糖尿病患者数量达4.25亿，其中II型糖尿病占90％。长期血糖增高，大血管、微血管受损并危及心、脑、肾、周围神经、眼睛、足等，据世界卫生组织统计，糖尿病并发症高达100多种，是目前已知并发症最多的一种疾病。糖尿病死亡者有一半以上是心脑血管所致，10％是肾病变所致。临床数据显示，糖尿病发病后10年左右，将有30％～40％的患者至少会发生一种并发症，且并发症一旦产生，药物治疗很难逆转，因此强调尽早预防糖尿病并发症。

目前常用的降糖药物主要有胰岛素及其类似物、GLP-1受体激动剂、DDP-4酶抑制剂、二甲双胍类等多个类型品种。其中于2017年12月6日获得美国FDA批准上市的索马鲁肽，其在降糖、减肥领域的巨大优势，同时索马鲁肽也是继恩格列净、利拉鲁肽之后，第三个显示具有心血管获益的降糖药。索马鲁肽为GLP-1类似物，与人GLP-1有94％同源性。索马鲁肽在第8位修改为α-氨基异丁酸，用来增加稳定作用，避免被DPP-4酶降解。此外，通过结构修饰，把肽链第26位的赖氨酸位置连接上18碳脂肪二酸侧链，相比C16的利拉鲁肽，增长的碳链对白蛋白的亲和力增强5～6倍，与白蛋白结合，避免快速被肾脏清除并防止代谢性降解，延长体内半衰期。在安全性方面索马鲁肽跟利拉鲁肽、度拉糖肽类似，不良反应可随时间消失。2019年3月20日，诺和诺德宣布向FDA提交了口服索马鲁肽的两项新药上市申请(NDA)。索马鲁肽将是未来数年诺和诺德的业务支柱和增长驱动，有分析师预测其销售峰值有望超过100亿美元。索马鲁肽的结构式如下：

现有技术中26位K常用的侧链保护基有Mtt和Alloc，脱除Mtt的时候酸性条件难免对其他侧链保护基比如Trt，Boc有影响，且在放大过程中很难保证完全脱除；多次酸处理的话也会导致多肽从2-CTC树脂上裂解脱落；与此同时，Alloc保护基脱除的问题之一就是样品可能会被染色和金属残留的问题，使得样品的性状较差；此外，在Alloc脱除过程中，如果Alloc的捕获剂捕获不到位，会使MS大40，后续氨基酸没法偶联。两种方法，都会导致收率和纯度不高。

索马鲁肽序列中疏水性氨基酸的存在使得肽链之间的氢键更稳定，产生严重的β折叠，肽链与肽链之间的作用力增强，导致树脂缩聚，降低了偶联的反应活性和效率。目前，有专利中提到使用Ser-Thr伪脯二肽、Ser-Ser以二肽片段的形式偶联来提高偶联的效率。此外，还有使用在(Gly¹⁰-Thr¹¹)、(Phe¹²-Thr¹³)、(Thr¹³-Ser¹⁴)、(Val¹⁶-Ser¹⁷)和(Ser¹⁷-Ser¹⁸)五个位置中的一个用O-异酰化二肽进行偶联，之后进行O→N转移反应，就可以得到粗肽索马鲁肽，但是在此过程中比较容易发生消旋的问题。

因此，在本领域仍需要开发一种简便、高效的索马鲁肽制备方法。

发明内容

本发明的目的是提供一种简便、高效的索马鲁肽制备方法，解决目前索马鲁肽制备工艺繁琐、效率低或纯化难度高的问题。本发明的目的可以通过以下技术方案实现。