[发明专利]一种心血管药物中蟾酥的主要药效成分含量的一测多评方法

权利要求书

1.一种心血管药物中蟾酥的主要药效成分含量的一测多评方法，包括：将心血管药物样品加入有机溶剂溶解，超声提取后冷却、过滤，取续滤液获得的供试品溶液，采用高效液相色谱质谱联用法，以华蟾酥毒基为内参物，获得其与蟾毒灵、脂蟾毒配基的相对校正因子，建立一测多评法测定供试品溶液中华蟾酥毒基、蟾毒灵、脂蟾毒配基的含量。

2.根据权利要求1所述的一种心血管药物中蟾酥的主要药效成分含量的一测多评方法，其特征在于，所述供试品溶液包括以下条件中的任一项或多项：

A1)所述心血管药物样品加入的质量与有机溶剂加入的体积之比为0.5:5-15，g/mL；

A2)所述有机溶剂为甲醇；

A3)所述超声提取时间为20～40min。

3.根据权利要求1所述的一种心血管药物中蟾酥的主要药效成分含量的一测多评方法，其特征在于，所述一测多评法测定华蟾酥毒基、蟾毒灵、脂蟾毒配基的含量，包括以下步骤：

1)配制对照品溶液：将华蟾酥毒基、蟾毒灵、脂蟾毒配基对照品，加入有机溶剂溶解并定容，配成对照品溶液；

2)供试品溶液中华蟾酥毒基的测定：采用高效液相色谱质谱联用法检测供试品溶液和步骤1)中的对照品溶液，比较精确相对分子质量、相对保留时间进行定性，采用外标法进行定量，确定供试品溶液中华蟾酥毒基的含量；

3)供试品溶液中蟾毒灵、脂蟾毒配基的测定：以对照品溶液中华蟾酥毒基为内参物，通过多点校正法或斜率法计算获得其与对照品溶液中蟾毒灵、脂蟾毒配基的相对校正因子，再根据供试品溶液中蟾毒灵、脂蟾毒配基的色谱峰面积，确定供试品溶液中蟾毒灵、脂蟾毒配基的含量。

4.根据权利要求3所述的一种心血管药物中蟾酥的主要药效成分含量的一测多评方法，其特征在于，步骤1)中，所述有机溶剂为甲醇；所述对照品溶液中各成分的含量范围为：华蟾酥毒基为1-350μg/mL、蟾毒灵为1-200μg/mL、脂蟾毒配基为1-200μg/mL。

5.根据权利要求3所述的一种心血管药物中蟾酥的主要药效成分含量的一测多评方法，其特征在于，步骤2)中，所述高效液相色谱质谱联用法中，所述高效液相色谱的测定条件为：检测器为二极管阵列检测器；波长为294～398nm；色谱柱为C₁₈色谱柱；柱温为30～40℃；流速为0.5～0.7mL/min；进样量为5～15μL；流动相为乙腈-0.05-0.15％磷酸二氢钾水溶液，其中，A相为乙腈，B相为0.05-0.15％磷酸二氢钾水溶液、磷酸调节pH为3.1-3.3；分析时间为60min；梯度洗脱。

6.根据权利要求5所述的一种心血管药物中蟾酥的主要药效成分含量的一测多评方法，其特征在于，所述梯度洗脱的具体程序为：0～30min，A相：B相体积比为48：52-48：52；30～31min，A相：B相体积比为48：52-70：30；31～45min，A相：B相体积比为70：30-70：30；45～48min，A相：B相体积比为70：30-48：52；48～60min，A相：B相体积比为48：52-48：52。

7.根据权利要求3所述的一种心血管药物中蟾酥的主要药效成分含量的一测多评方法，其特征在于，步骤2)中，所述高效液相色谱质谱联用法中，所述质谱的测定条件为：离子源为电喷雾离子源ESI；检测模式为正离子模式；雾化气体为氮气；脱溶剂气流量为700-900L·h^-1；脱溶剂气温度为500-700℃；气帘气体积流量为45-55L·h^-1；毛细管电压为15-20kV；锥孔电压为45-55V；补偿电压为75-85V；扫描范围为m/z 100～1200amu；扫描时间：55-65min。