[发明专利]一种胶原蛋白复合透明质酸凝胶、细胞外基质仿生材料及制备方法在审
申请号: | 202110281041.2 | 申请日: | 2021-03-16 |
公开(公告)号: | CN112980001A | 公开(公告)日: | 2021-06-18 |
发明(设计)人: | 余建文;商造森 | 申请(专利权)人: | 杭州基智生物科技有限公司 |
主分类号: | C08J3/075 | 分类号: | C08J3/075;C08J3/24;C08L5/08;C08L89/00;A61L27/20;A61L27/24;A61L27/36;A61L27/50;A61L27/58 |
代理公司: | 成都鱼爪智云知识产权代理有限公司 51308 | 代理人: | 赵晨宇 |
地址: | 310000 浙江省杭州市余*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 胶原 蛋白 复合 透明 凝胶 细胞 基质 生材 料及 制备 方法 | ||
1.一种胶原蛋白复合透明质酸凝胶的制备方法,其特征在于,包括如下步骤,将胶原蛋白和透明质酸分别制成溶液后混合,交联,得到所述胶原蛋白复合透明质酸凝胶。
2.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述胶原蛋白和透明质酸的重量比为1:(1~10)。
3.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述交联过程中所用交联剂为京尼平、聚乙二醇、戊二醛、碳化二亚胺、异氰酸盐、环氧化合物、DPPA、NDGA、DVS、DBBE中的一种或几种,所述交联温度为45~70℃,交联时间为1h~3.5h。
4.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述胶原蛋白选自I型胶原蛋白、III型胶原蛋白和弹性胶原蛋白中的一种或多种。
5.一种如权利要求1-4任意一项所述的制备方法制备的胶原蛋白复合透明质酸凝胶。
6.一种含有权利要求5所述的胶原蛋白复合透明质酸凝胶的细胞外基质仿生材料的制备方法,其特征在于,包括如下步骤,
将所述胶原蛋白复合透明质酸凝胶冻干后得到凝胶冻干粉;
将自体组织先脱细胞后再冻干制成细胞外基质冻干粉,将所述细胞外基质冻干粉溶于水、生理盐水、磷酸盐缓冲液或平衡盐溶液,得到细胞外基质溶液;
将所述凝胶冻干粉溶于所述细胞外基质溶液,溶胀后得到细胞外基质仿生材料。
7.根据权利要求6所述的制备方法,其特征在于,所述凝胶冻干和细胞冻干的条件为-20℃~-80℃下冷冻12~24h,然后真空干燥24~48h。
8.根据权利要求6所述的制备方法,其特征在于,所述脱细胞和冻干包括如下步骤,将自体组织用0.6~0.8g/L的胶原酶酶解过夜,再置于-70℃以下冷冻20~40min,再36~37℃加热15~30min,反复4~6次,然后于1wt%~1.2wt%的SDS震荡3~6h,清洗消毒后得到所述自体组织脱细胞膜;将所述自体组织脱细胞膜冻干后得到细胞外基质冻干粉。
9.根据权利要求8所述的制备方法,其特征在于,所述胶原酶的浓度为0.7g/L,所述SDS的浓度为1wt%。
10.根据权利要求6所述的制备方法,其特征在于,所述凝胶冻干粉和所述细胞粉末的重量比为1:(1~10)。
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