[发明专利]一种乳糖含量检测的方法和试剂

权利要求书

1.一种乳糖检测试剂，其特征在于，所述试剂包括试剂组合物A和试剂组合物B；

所述试剂组合物A主要包括缓冲液a、单糖氧化酶、氢供体1、过氧化氢酶；

所述试剂组合物B主要包括缓冲液b、乳糖酶或者半乳糖甘酶、过氧化氢酶抑制剂、过氧化物酶、氢供体2。

2.根据权利要求1所述的乳糖检测试剂，其特征在于，所述过氧化物酶和联合氢供体构成显色体系。

3.根据权利要求1所述的乳糖检测试剂，其特征在于，所述缓冲液a或者缓冲液b都分别选自哌嗪-N，N'-二(2-乙磺酸)(PIPES)、4-(2-羟乙基)-1-哌嗪乙烷磺酸半钠盐(HEPES)、2-吗啉乙磺酸(MES)、三羟甲基氨基甲烷(Tris)、N-三-(羟甲基)甲基氨基乙酸(Tricine)、三乙醇胺缓冲液、咪唑缓冲液、磷酸缓冲液、柠檬酸缓冲液、3-(N-吗非啉)乙磺酸(MOPS)中的任一种。

4.根据权利要求1所述的乳糖检测试剂，其特征在于，所述单糖氧化酶选自葡萄糖氧化酶、半乳糖氧化酶或者吡喃糖氧化酶中的任一种。

5.根据权利要求1所述的乳糖检测试剂，其特征在于，所述氢供体1和氢供体2为联合氢供体所述氢供体1选自苯胺衍生物，所述氢供体2选自4-氨基安替比林或甲基苯并噻唑啉酮腙中任一。

6.一种乳糖检测方法，所述方法包括：首先利用单糖氧化酶分解待检测样品中的单糖，产生的过氧化氢使用过氧化氢酶分解，过氧化氢酶的活性使用过氧化氢酶抑制剂消除；然后利用乳糖酶或者半乳糖甘酶分解待检测样品中的乳糖产生葡萄糖和半乳糖，葡萄糖和半乳糖在单糖氧化酶催化下产生过氧化氢，过氧化氢在过氧化物酶存在下通过与氢供体和氢受体的偶联反应使由此产生的过氧化氢形成有色醌，通过吸光光度法检测有色醌的含量，进而计算乳糖的含量。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述方法包括：所述检测方法在pH6.0-8.5的范围内进行。

8.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述方法在2℃-45℃的温度下进行。

9.采用如权利要求1所述的检测试剂乳糖检测乳糖的方法，所述方法包括：

a、利用试剂组合物A分解待检测样品中的单糖，直到单糖分解完全；

b、利用试剂组合物B分解待检测样品中的乳糖，通过吸光度检测醌的含量进而计算出乳糖的含量。

10.如权利要求1-5任一项所述的乳糖检测试剂用于检测样品中乳糖含量的用途。