[发明专利]一种透射电镜样品的制备方法

权利要求书

1.一种透射电镜样品的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：将样品固定后用染色剂进行预染色，然后经脱水、过渡、渗透与包埋、切片、染色后得到透射电镜样品。

2.根据权利要求1所述的透射电镜样品的制备方法，其特征在于，所述的染色剂为质量分数0.5％的乙酸双氧铀水溶液。

3.根据权利要求2所述的透射电镜样品的制备方法，其特征在于，所述的预染色具体为：将固定后的样品置于质量分数0.5％的乙酸双氧铀水溶液过夜，然后用磷酸钠缓冲液漂洗。

4.根据权利要求3所述的透射电镜样品的制备方法，其特征在于，具体步骤如下：

1)戊二醛、饿酸双固定法固定：将样品用2.5％戊二醛固定液抽真空固定24小时以上，用0.1M，pH 7.2的磷酸钠缓冲液漂洗，然后用0.1M，pH 7.2的磷酸钠缓冲液配制的质量分数1％的饿酸溶液后固定4小时后，用0.1M，pH 7.2的磷酸钠缓冲液漂洗；

2)预染色：将固定后的样品置于质量分数0.5％的乙酸双氧铀水溶液过夜，然后用0.1M，pH 7.2的磷酸钠缓冲液漂洗；

3)脱水：将预染色后的样品依次用体积分数30％的乙醇水溶液、体积分数50％的乙醇水溶液、体积分数70％的乙醇水溶液、体积分数80％的乙醇水溶液、体积分数90％的乙醇水溶液、无水乙醇脱水，环氧丙烷置换；

4)过渡、渗透与包埋：将脱水后的样品依次用环氧丙烷：包埋剂体积比＝3:1混合液、环氧丙烷：包埋剂体积比＝1:1混合液、环氧丙烷：包埋剂体积比＝1:3混合液过渡，包埋剂渗透，然后将样品置于包埋管中，注满包埋剂，60℃聚合；

5)切片，然后置于质量分数0.5％的乙酸双氧铀水溶液过夜，再用0.1M，pH 7.2的磷酸钠缓冲液漂洗，得到透射电镜样品。

5.根据权利要求1-4任一项所述的透射电镜样品的制备方法，其特征在于，所述的包埋剂为环氧树脂-812，所述的样品为尖孢镰刀菌孢子。

6.一种透射电镜样品的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：将样品固定后进行脱水，在脱水期间进行预染色，然后经过渡、渗透与包埋、切片、染色后得到透射电镜样品。

7.根据权利要求6所述的透射电镜样品的制备方法，其特征在于，所述的染色剂为体积分数70％的乙醇水溶液配制的质量分数0.5％的乙酸双氧铀溶液。

8.根据权利要求7所述的透射电镜样品的制备方法，其特征在于，所述的将样品固定后进行脱水，在脱水期间进行预染色具体为：将固定后的样品依次用体积分数30％的乙醇水溶液脱水，体积分数50％的乙醇水溶液脱水，体积分数70％的乙醇水溶液配制的质量分数0.5％的乙酸双氧铀溶液预染色，体积分数70％的乙醇水溶液脱水，体积分数80％的乙醇水溶液脱水，体积分数90％的乙醇水溶液脱水，无水乙醇脱水，环氧丙烷置换。