[发明专利]一种高对比度区分癌细胞/组织的方法及荧光探针的制备

权利要求书

1.用于区分癌细胞/组织和正常细胞/组织的ROS荧光探针，其特征在于，探针结构式如下：

，其中R为-CH(CH₃)₂。

2.权利要求1所述的荧光探针的制备方法，其特征在于，步骤如下：

（1）在N₂保护下，将4,4'-亚甲基双（3-溴-N,N-二甲基苯胺）溶于干燥的THF中，溶液冷却至-78^oC并逐滴加入正丁基锂溶液n-BuLi，反应液在此温度下搅拌反应2小时后，继续加入二氯二烷基硅烷，室温搅拌反应2小时；

反应结束后，向上述反应液中加入1 N的HCl至反应液呈中性，在旋转蒸发仪上蒸干THF，剩余水溶液用EtOAc萃取，收集有机相，有机相经洗涤、干燥、蒸发后得中间体，将该中间体与KMnO₄粉末溶于丙酮中，-15^oC下反应2小时，反应液经过滤、蒸发后得到硅氧杂蒽酮化合物；

（2）在N₂保护下，将硅氧杂蒽酮化合物溶于干燥的CH₃CN中，向该溶液中逐滴滴入Tf₂O，反应液在将0^oC搅拌反应10分钟，然后继续加入2,4-二甲基-3-乙基吡咯，室温搅拌反应10分钟，减压除去溶剂，所得固体经柱色谱纯化得PSiR。

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于：所述步骤中4,4'-亚甲基双（3-溴-N,N-二甲基苯胺）和二氯二烷基硅烷的摩尔比为1：1.8；中间体与KMnO₄的摩尔比为1：2.5；Tf₂O、硅氧杂蒽酮和2,4-二甲基-3-乙基吡咯的摩尔比为2.2：1：3。