[发明专利]一种检测alpha-synuclein蛋白的鼠单克隆抗体及其应用

说明书

本发明公开了一种检测alpha‑synuclein蛋白的鼠单克隆抗体，所述鼠单克隆抗体能够能特异性识别细胞内源的alpha‑synuclein蛋白，本发明还公开了一种检测alpha‑synuclein蛋白的组合试剂、试剂盒或者试纸条。本发明对细胞内源的alpha‑synuclein蛋白具有极高的特异性，可作为临床研究筛选的重要抗体试剂原料。

技术领域

本发明公开了一种检测alpha-synuclein蛋白的鼠单克隆抗体及其应用，属于免疫学领域。

背景技术

帕金森病(Parkinson’s disease，PD)是一种渐进而又不可逆性的运动障碍神经系统退行性疾病，是中枢神经系统第二大常见的原发性神经退行性疾病，发病者以中老年人群为主，由多巴胺神经递质缺乏而引起一系列运动症状，以静止性颤动、肌肉紧张强直、运动迟钝缓慢、姿势步态异于正常为主要临床特点。对帕金森病的诊断主要根据患者所表现临床症状、体征，再结合患者对多巴胺能的反应性，综合性的进行诊断，所以往往只能发现中晚期病例，且容易漏诊和误诊。因此为达到早期干预和延缓病损，探索和发现一些敏感性高、特异性强的生物学指标用于PD的早期诊断已成为临床医学亟待解决的问题。

alpha-突触核蛋白(alpha-synuclein，AS)是非beta淀粉样蛋白的前体蛋白，基因位于4q21.3-q22，由6个外显子和若干个内含子组成，其编码的AS由140个氨基酸组成，N端含有5-7个不完全的重复序列(KTKEGV共有基序)，是蛋白质的兼性区域；中央疏水区域(第61-95位残基)含有非beta淀粉样成分结构域，是AS聚集必须的成分。正常情况下AS是以无规则卷曲的形式存在，在PD疾病中，错误折叠的AS异常聚集、沉积，形成路易小体(Lewybody)，并通过减少多巴胺释放，增加代谢产物，最终导致多巴胺能神经元变性，进而影响到PD的发生。AS的异常折叠在帕金森病和其他突触核蛋白聚集障碍的发展中起着核心作用，因此AS的变化被认为是能作为反应PD病理变化的潜在生物标志物

目前已有一些文献对PD病例和正常人群体液中AS的含量变化进行了研究，但研究结果差异很大，不排除所用AS抗体特异性的因素。本专利提供了一株能特异性识别细胞内源AS蛋白的鼠单克隆抗体，具有极高的特异性。

发明内容

为了克服上述不足，本发明公开了一种检测alpha-synuclein蛋白的鼠单克隆抗体及试剂盒。

本发明人发现并鉴定了一种检测alpha-synuclein蛋白的鼠单克隆抗体，命名为：3F6，能够能特异性识别细胞内源的alpha-synuclein蛋白，具有极高的特异性。

更详细地，本发明还提供了下列技术方案：

一种检测alpha-synuclein蛋白的鼠单克隆抗体，其重链可变区的氨基酸序列为SEQ ID NO：1，其轻链可变区的氨基酸序列为SEQ ID NO：2。

进一步地，本发明一种检测alpha-synuclein蛋白的组合试剂，组合试剂中包括上述的鼠单克隆抗体。

进一步地，本发明还提供给了一种试剂盒或试纸条，包含所述鼠单克隆抗体及其他一些组合试剂。

所述组合试剂、试剂盒或试纸条还包含现有技术中常见的检测抗体的显色试剂，在此不做过多说明，另外，试剂盒中还可能包括其他添加物，诸如缓冲液、洗涤液等，试剂盒的成分以预定比例提供，各试剂的相对量适当地变化以使测定法灵敏度最大化。

本发明的有益效果是：

本发明提供了一株能特异性识别细胞内源AS蛋白的鼠单克隆抗体，具有极高的特异性，可作为临床研究筛选的重要抗体试剂原料。

附图说明

图1是本发明实施例中4株结合his-alpha-synuclein重组蛋白的单克隆细胞株：分别为1B5、3F6、5A1、6H5；