[发明专利]用于栽培桃离体芽段组培生根的方法

说明书

本发明公开了一种用于栽培桃离体芽段组培生根的方法，属于植物快繁及细胞工程领域。本方法包括下列步骤：①培养基配制；②外植体制备；③不定根诱导培养；④不定根伸长生长培养；⑤炼苗与移栽。本发明主要是利用生根培养基和根伸长生长培养基，采取两步法来诱导不同栽培种桃的无菌苗芽段外植体生根和根的伸长生长，最终获得完整的植株。本发明实现了不同栽培种桃的离体芽段外植体在短时间内快速组培生根繁殖的目标，为快速繁殖优良品种提供了新的方法和技术支撑。

技术领域

本发明涉及属于植物快繁及细胞工程领域，特别涉及一种用于栽培桃离体芽段组培生根的方法。

背景技术

桃属于蔷薇科，李属，桃亚属植物。栽培种桃是世界性重要果树，果实具有重要的营养价值。众所周知，桃是异花授粉植物，其后代基因型与母本差异大，因此，传统上经常利用嫁接技术来保存优良的品种和大量地生产农业上需要的栽培苗。但是，在农业栽培中，通过栽培种的枝条与砧木品种嫁接获得栽培苗具有耗时长、费人力、成本大等缺点。因此，降低成本、缩短获得栽培苗的时间周期成为育种工作者迫切需要解决的问题。当前，植物组培快繁技术被广泛的应用于农业生产。例如，通过利用含有外援激素的培养基来诱导柑橘、李子、苹果等果树植物的离体芽段外植体生根可以获得大量的组培苗。然而，桃作为蔷薇科的一种主要的木本果树，其离体组织生根难已被广大果树科学研究者共知。因此，建立一种针对栽培品种的离体组织快速生根的方法对桃育种技术研究及农业生产应用具有深远意义。

发明内容

本发明的目的是在于提供了一种用于栽培桃离体芽段组培生根的方法，实现栽培品种桃的离体芽段外植体的根器官再生，且生根速度快、根再生率高。

本发明的目的是这样实现的：

具体地说，本方法包括下列步骤：

①培养基配制

首先是生根培养基的配制，即1/2MS+3mg/L IBA+30g/L蔗糖+8g/L琼脂，PH＝5.8；其次是根伸长生长培养基的配制，即1/2MS+30g/L蔗糖+8g/L琼脂，PH＝5.8；调节pH值后于灭菌锅中121℃高压灭菌20min；

②外植体制备

以枣油桃或绿化九号无菌苗长2-3cm芽段作为外植体，将芽段外植体的轴段下端斜切待用；

③不定根诱导培养

将步骤②中准备好的芽段外植体接种在生根培养基上诱导芽段外植体再生不定根；

④不定根伸长生长培养

在步骤③中，待芽段外植体伤口处的不定根生长至0.5-1cm后，将其转移至根伸长生长培养基上培养，使根正常伸长生长，以获得根系发达的完整植株；

⑤炼苗与移栽：

将步骤④中根系发达的完整植株在培养瓶中注入3mL无菌水覆盖培养基表面，打开瓶盖，在组培室炼苗，炼苗期间注意瓶中无菌水量的保持，炼苗5d左右后，取出组培苗，洗干净根上的琼脂后移栽到珍珠岩：腐殖质＝1：2的营养土中；

在步骤③和步骤④中，芽段外植体的不定根诱导培养和不定根伸长生长培养的条件均是光照强度800-1200Lux，光周期16h光照、8h黑暗，培养温度24-26℃，而培养时间分别是2周左右和1个月左右；

在步骤⑤中，炼苗过程中植株的生长环境条件与步骤③一致，而植株移栽到营养土中后的生长条件为光照强度1200-1800Lux，光照周期是16h光照、8h黑暗，温室环境温度22-24℃，湿度65％左右。

工作机理：