[发明专利]新型冠状病毒Ad26腺病毒载体疫苗及其制备方法与应用

权利要求书

1.一种新型冠状病毒Ad26腺病毒载体，其特征在于，所述Ad26腺病毒载体负载有新冠病毒Spikes优化序列；所述新冠病毒Spikes优化序列优选为如SEQ ID NO.1所示序列。

2.根据权利要求1所述的新型冠状病毒Ad26腺病毒载体，其特征在于，所述Ad26腺病毒载体为复制缺陷型Ad26腺病毒载体。

3.根据权利要求2所述的腺病毒载体疫苗，其特征在于：所述复制缺陷型Ad26腺病毒载体为缺失E1和E3区基因的复制缺陷型Ad26腺病毒载体。

4.根据权利要求1所述的新型冠状病毒Ad26腺病毒载体，其特征在于，外源基因启动子选自人巨细胞病毒CMV启动子、鼠巨细胞病毒CMV启动子、EF1a或PGK1中的至少一种。

5.根据权利要求1-4任一项所述的新型冠状病毒Ad26腺病毒载体，其特征在于，所述Ad26腺病毒载体可以调控SEQ ID NO：1所示核酸序列的表达。

6.一种新型冠状病毒Ad26腺病毒载体的制备方法，包括如下步骤：

(1)扩增SEQ ID NO.1所示序列，重组构建穿梭质粒1；

(2)扩增穿梭质粒1基因组，重组构建穿梭质粒2；

(3)扩增穿梭质粒2基因组，重组构建穿梭质粒3；

(4)扩增穿梭质粒3基因组，得到目的片段CMV-SPd-BGH，将目的片段CMV-SPd-BGH与去除E1和E3基因的pAd26质粒共转染至细胞中，即得新型冠状病毒Ad26腺病毒载体。

7.一种新型冠状病毒Ad26腺病毒载体疫苗，其特征在于，所述疫苗包括权利要求1-5任一项所述新型冠状病毒Ad26腺病毒载体或由权利要求6所述制备方法制备得到的载体。

8.根据权利要求7所述的新型冠状病毒Ad26腺病毒载体疫苗，其特征在于，所述新型冠状病毒Ad26腺病毒载体可在人源细胞或人体内表达蛋白。

9.根据权利要求7所述的新型冠状病毒Ad26腺病毒载体疫苗，其特征在于：所述的疫苗为DNA质粒或RNA表达质粒。

10.根据权利要求8所述的新型冠状病毒Ad26腺病毒载体疫苗，其特征在于，所述蛋白可在人体内：

诱导免疫应答；或

产生生物报告分子；或

用于检测的追踪分子；或

调节基因功能；或

作为治疗性分子。

11.根据权利要求7-10任一项所述的新型冠状病毒Ad26腺病毒载体疫苗，其特征在于，所述新型冠状病毒Ad26腺病毒载体疫苗中还包括药学上可接受的免疫调节剂、载体、稀释剂、赋形剂或至少一种对COVID-19有治疗作用的药物。