[发明专利]一种高繁殖率的胚胎体外生产方法有效
申请号: | 202110293345.0 | 申请日: | 2021-03-19 |
公开(公告)号: | CN112877278B | 公开(公告)日: | 2023-01-06 |
发明(设计)人: | 王争光;李奎;董信阳;秦啼 | 申请(专利权)人: | 浙江大学 |
主分类号: | C12N5/073 | 分类号: | C12N5/073;C12M1/00;C12M1/22;C12M3/00;A01N1/02 |
代理公司: | 杭州橙知果专利代理事务所(特殊普通合伙) 33261 | 代理人: | 杜放 |
地址: | 310058 浙江*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 繁殖率 胚胎 体外 生产 方法 | ||
本发明公开了一种高繁殖率的胚胎体外生产方法,包括以下步骤:a、采集:将采集的动物卵巢待会实验室;b、预处理:将卵母细胞用成熟液洗涤;c、受精:胚胎移入受精液中;d、培养:将受精卵移入细胞培养箱中开始培养;其中,d步骤中所述细胞培养箱包括主体、固定杆、进料口、出料口、分隔板、通口、支撑板、活动板、气压仓、气压板、抵压块、卡扣、卡扣弹簧、螺旋槽、环槽、对接槽、旋转机构;本发明通过该方式进行培养,能实施观察胚胎发育过程,从而保证了培养的繁殖率;将胚胎放入主体内时,胚胎的重力驱动支撑板向下移动并且旋转;使胚胎位于分隔板下方,与其他支撑板隔离;从而使胚胎存放时不会改变主体内的环境,从而保证了胚胎的活性。
技术领域
本发明属于动物胚胎体外生产技术领域,尤其是涉及一种高繁殖率的胚胎体外生产方法。
背景技术
随着现代繁殖生物技术的发展及胚胎体外生产技术的逐步完善,动物体外生产技术已成为加快品种选育和优良种群扩繁速度的重要途径;虽然通过胚胎体外生产技术已经获得了活的后代,但体外受精获得的体外胚胎在培养过程中普遍存在发育阻断现象,导致体外胚胎的囊胚发育率远低于体内胚胎;目前的动物胚胎体外培养的营养环境是导致上述问题的关键原因之一,如查放置胚胎的时候,由于需要将培养箱打开,因此会扰乱培养箱内的环境温度;从而影响了胚胎的发育,降低了繁殖效率。
发明内容
本发明为了克服现有技术的不足,提供一种高繁殖率的胚胎体外生产方法。
为了实现上述目的,本发明采用以下技术方案:包括以下步骤:
a、采集:将采集的动物卵巢带回实验室;
b、预处理:将卵母细胞用成熟液洗涤3次,培养27-28h;
c、受精:卵母细胞移入受精液中,受精液中含b步骤处理的卵胞;
d、培养:将c中的受精卵移入颗粒细胞培养箱中,每隔48h换培养液,培养144-168h后收集胚胎
其中,d步骤中所述细胞培养箱包括主体、设于所述主体内的固定杆、设于所述主体顶部的进料口、设于所述主体侧壁上的出料口、设于所述主体内部的分隔板、设于所述分隔板上的通口、设于所述固定杆上的多个支撑板、设于所述支撑板上的活动板、设于所述固定杆上的移动装置;所述移动装置包括设于所述固定杆内的气压仓、设于所述气压仓上的气压板、设于所述气压板上的抵压块、设于所述抵压块上的卡扣、设于所述卡扣上的卡扣弹簧、设于所述抵压块上的螺旋槽、设于所述抵压块上的环槽、设于所述支撑板上的对接槽、设于所述气压板上的气压弹簧、设于所述气压仓内的旋转机构;打开进料口,直接将装有胚胎的培养皿放入进料口内,然后活动板受到培养皿的重力驱动支撑板向下移动;进一步的带动抵压块向下移动,此时与气压板向下移动;然后在气压仓内产生气压,驱动旋转机构开始旋转;然后带动支撑板开始旋转,此时带有胚胎培养皿的支撑板位于分隔板的下方;同时未装有胚胎培养皿的支撑板旋转至进料口的正下方,准备接料。
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