[发明专利]二氧化钛纳米粒子培养基的制备方法

说明书

本发明公开了一种二氧化钛纳米粒子培养基的制备方法，包括以下步骤：1)将二氧化钛纳米粒子与吐温20混合，得到的混合液在冰浴条件下超声处理；2)将步骤1)得到的二氧化钛‑吐温20混合液加入血清的质量分数为1％‑10％的细胞培养基中；3)将步骤2)得到的混合溶液进行超声处理，得到二氧化钛纳米粒子培养基。本发明通过结合表面活性剂及超声分散的方法使二氧化钛纳米粒子能均匀稳定分散于培养基中，所制备的培养基能够稳定保持至少2天，从而便于在体外研究二氧化钛纳米粒子的生物效应；本发明的制备方法简单易行、易于操作，且可重复性强，可为纳米粒子生物效应研究提供良好的对象。

技术领域

本发明涉及培养基制备技术领域，特别涉及一种二氧化钛纳米粒子培养基的制备方法。

背景技术

二氧化钛纳米粒子，也被称为钛白粉，是直径在100nm以下，外观为白色疏松粉末，具有抗菌、抗氧化的功能，目前被广泛应用于化妆品、功能纤维、塑料、涂料乃至食品等领域。但如此广泛的应用也导致二氧化钛被大量的排放入环境，被人体直接或间接吸收，成为潜在的毒性物质。有鉴于此，环境毒理学中均需针对二氧化钛的生物效应及毒副作用展开研究。

体外细胞实验是进行生物效应评价的主要手段之一。然而，二氧化钛纳米粒子不溶于水，进入培养基后极易聚团沉淀，使培养基中的纳米粒子浓度迅速降低，因此给其生物学评价试验带来了巨大的不便。目前的研究中多采用高盐(8％，质量浓度)溶液配合超声进行，但由于细胞培养中的盐浓度有限，原本的高盐溶液被培养基稀释后，盐浓度降低，进而失去原本的分散效果，纳米粒子依然会迅速聚团，仍不利于生物效应研究。

发明内容

本发明所要解决的技术问题在于针对上述现有技术中的不足，提供一种二氧化钛纳米粒子培养基的制备方法，通过结合表面活性剂及超声分散的方法使二氧化钛纳米粒子均匀分散于培养基中，进而可用于生物效应研究中。

为实现上述目的，本发明采用的技术方案是：一种二氧化钛纳米粒子培养基的制备方法，包括以下步骤：

1)将二氧化钛纳米粒子与吐温20混合，得到的混合液在冰浴条件下超声处理；

2)将步骤1)得到的二氧化钛-吐温20混合液加入血清的质量分数为1％-10％的细胞培养基中；

3)将步骤2)得到的混合溶液进行超声处理，得到二氧化钛纳米粒子培养基。

优选的是，所述步骤1)中二氧化钛纳米粒子的质量与吐温体积的比例小于50mg:1mL。

优选的是，所述步骤1)中二氧化钛纳米粒子的粒径小于20nm。

优选的是，所述步骤1)具体为：将二氧化钛纳米粒子与吐温20加入容器中混合后，将该容器置于冰浴中，再利用超声细胞裂解仪超声处理1分钟。

优选的是，所述超声细胞裂解仪进行超声处理的具体参数为：在频率40kHz、功率900W下，超声处理1s，间隔1s，循环30次。

优选的是，所述步骤2)中加入到细胞培养基中的二氧化钛-吐温20混合液的体积不超过细胞培养基体积的0.5％。

优选的是，所述细胞培养基为DMEM培养基、DMEM/F12培养基、RPMI1640培养基或William's E培养基。

优选的是，所述步骤3)具体为：将步骤2)得到的混合溶液置于容器中，然后将该容器置于超声清洗仪中，超声处理1-2h。

优选的是，所述步骤3)中，超声清洗仪进行超声处理的具体参数为：频率10kHZ，功率100w。

本发明的有益效果是：本发明通过结合表面活性剂及超声分散的方法使二氧化钛纳米粒子能均匀稳定分散于培养基中，所制备的培养基能够稳定保持至少2天，从而便于在体外研究二氧化钛纳米粒子的生物效应；本发明的制备方法简单易行、易于操作，且可重复性强，可为纳米粒子生物效应研究提供良好的对象。